熱休克蛋白90在妊娠期高血壓疾病患者血清和胎盤中的表達研究.pdf

1、目的：妊娠期高血壓疾病(hypertensive disorders complicating pregnancy， HDCP)是妊娠期的特有疾病，在我國平均發(fā)病率為9.40％，嚴重威脅母嬰的生命安全，但其確切病因及發(fā)病機制至今未能闡明，一直是婦產科領域的重要研究課題。熱休克蛋白(heat shock protein，HSP)90是熱休克蛋白家族中重要的成員之一，是存在于真核生物和細菌中的一種基本的重要的分子伴侶，作為特異分子伴侶的HS

2、P90參與多種信號途徑中的激酶、核受體和p53等轉錄因子活性的調節(jié)，在細胞生長發(fā)育、分化、蛋白質合成、折疊運輸和分解、細胞骨架的功能、膜功能以及應激條件下對細胞的保護等生理代謝中起著重要的生物學作用。但目前尚無HSP90在妊娠期高血壓疾病中的研究報道。本課題旨在探討熱休克蛋白90與妊娠期高血壓疾病發(fā)生的關系，以及為病情嚴重程度的判定奠定基礎，探索妊娠期高血壓疾病的
　　，以便為更好的防治本病，降低圍產期母兒死亡率。
　　

3、 方法：資料來源：選自在河北省石家莊市第四醫(yī)院2009年10月至2010年10月住院分娩的產婦共150例，所有病例均為初次分娩且為剖宮產。按照第七版《婦產科學》妊娠期高血壓疾病的診斷標準分為四組：第1組正常孕婦30例；第2組妊娠期高血壓孕婦40例；第3組輕度子癇前期孕婦40例；第4組重度子癇前期40例。四組之間年齡、孕周、體重、孕產次均無統(tǒng)計學差異。所有研究對象晨起空腹采肘靜脈血2ml，分娩時采臍靜脈血2ml，離心10m后取上清液，-8

4、0℃保存，待行ELISA檢測HSP90含量。取行剖宮產孕婦于胎盤娩出后即刻，避開壞死和鈣化區(qū)域，取胎盤組織塊大小為1×1×1cm3，立即將組織置入-196℃液氮罐內冷凍保存，準備進行定量聚合酶鏈反應(Real-timePCR)和Westernblot檢測HSP90基因和蛋白表達。
　　 結果：
　　 1.一般情況妊娠期高血壓組、輕度子癇前期組、重度子癇前期組患者既往均無高血壓、心臟病、糖尿病、肝腎疾病、血栓性疾病、自身免

5、疫性疾病。此次妊娠不合并其他疾病。正常妊娠組孕婦BP＜140/90mmHg，尿蛋白(-)，無妊娠合并癥及并發(fā)癥，既往無自身免疫性疾病和反復流產、死胎病史。四組孕婦的一般情況比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　 2.在正常妊娠組、妊娠期高血壓組、輕度子癇前期組、重度子癇前期組靜脈血中HSP90水平分別為0.63±0.35，0.91±0.38，1.35±0.42，1.79±0.43(ng/ml)，均較正常組明顯升高，且均隨

6、著病情的加重逐漸升高(p＜0.01)。而且妊娠期高血壓組與正常妊娠組、輕度子癇前期組與妊娠期高血壓組、重度子癇前期組與輕度子癇前期組比較均有極顯著統(tǒng)計學差異(P＜0.01)。
　　 3.正常組、妊娠期高血壓組、輕度子癇前期組、重度子癇前期組臍帶血中HSP90水平分別為0.21±0.07，0.23±0.12，0.27±0.09，0.44±0.15(ng/ml)，可以看出，四組中除妊娠期高血壓組和輕度子癇前期組之間無明顯差異外（P＞

7、0.05），妊娠期高血壓組與正常妊娠組，重度子癇前期組與輕度子癇前期組兩兩比較均有統(tǒng)計學差異（P＜0.05），且重度子癇前期組與其它三組之間有極顯著差異(P＜0.01)．
　　 4.Western blotting實驗結果顯示，HSP90在妊娠期高血壓組、輕度子癇前期組、重度子癇前期組胎盤中的蛋白和基因表達明顯強于正常組，且呈現出逐漸加強的趨勢，有統(tǒng)計學差異(P＜0.01)。
　　 5.RT-PCR實驗結果顯示，HSP9

8、0在妊娠期高血壓組、輕度子癇前期組、重度子癇前期組胎盤中的蛋白和基因表達明顯強于正常組，且呈現出逐漸加強的趨勢，有統(tǒng)計學差異（P＜0.01）。
　　 6.直線相關分析：HSP90在外周血、臍帶血及胎盤中的表達與疾病的嚴重程度呈正相關（P＜0.01）。
　　 結論：HSP90的升高可能與妊娠期高血壓疾病的發(fā)生和發(fā)展有非常密切的關系，可以通過檢測外周血中HSP90的水平判斷和預測病情的嚴重程度。通過監(jiān)測臍血和胎盤組織中HSP