軟骨調(diào)節(jié)素在成人退變椎間盤中的表達(dá).pdf

1、我們實(shí)驗(yàn)室前期的研究結(jié)果顯示,在青少年特發(fā)性脊柱側(cè)凸(AIS)患者側(cè)凸頂點(diǎn)終板軟骨凸凹側(cè)蛋白質(zhì)組存在顯著差異,這些存在表達(dá)差異的蛋白很可能與椎間盤的不對(duì)稱發(fā)育有關(guān)。同時(shí)由于脊柱側(cè)凸可導(dǎo)致椎間盤承受異常的應(yīng)力,AIS患者椎間盤在成熟度和退變程度上與同齡正常人群存在顯著差異,這些存在表達(dá)差異的蛋白也很可能參與了椎間盤退變的病理過程。軟骨調(diào)節(jié)素(chondromodulin-Ⅰ,ChM-Ⅰ)是僅在凸側(cè)表達(dá)的關(guān)鍵蛋白之一。其主要作用在與促進(jìn)軟骨

2、生長(zhǎng),維持軟骨及所在組織的無血管活性,并與骨關(guān)節(jié)炎、心臟瓣膜病以及骨、軟骨腫瘤的發(fā)病有關(guān)。有關(guān)ChM-Ⅰ在椎間盤退變過程中的作用還未見深入報(bào)道。
　　 [目的]
　　 1.利用分子生物學(xué)及免疫組織化學(xué)方法研究ChM-Ⅰ在成人退變椎間盤細(xì)胞中的表達(dá)情況。
　　 2.觀察堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)對(duì)椎間盤細(xì)胞ChM-Ⅰ表達(dá)的影響。
　　 3.觀察ChM-Ⅰ在不同退變程度椎間盤組織中的表達(dá)情況。

3、　　 4.對(duì)ChM-Ⅰ在椎間盤退變過程中可能發(fā)揮的作用作初步探討。
　　 [方法]
　　 1.取3例因腰椎間盤退變性疾病而需行后路椎間融合患者的椎間盤組織分別進(jìn)行髓核及纖維環(huán)細(xì)胞培養(yǎng)。取部分原代細(xì)胞利用RT-PCR和Western blot研究ChM-Ⅰ mRNA和蛋白在成人退變椎間盤細(xì)胞中的表達(dá)情況。
　　 2.利用不同濃度(Ong/ml,1ng/ml和10ng/m1)bFGF刺激椎間盤細(xì)胞,利用real-t

4、ime RT-PCR和Western-Blot研究不同濃度bFGF對(duì)髓核細(xì)胞和纖維環(huán)細(xì)胞ChM-Ⅰ mRNA和蛋白表達(dá)的影響。
　　 3.收集因腰椎間盤退變性疾病而行手術(shù)切除的椎間盤組織標(biāo)本28例,根據(jù)MRI表現(xiàn)退變程度為Ⅲ～Ⅴ級(jí),作為退變組。收集因脊柱腫瘤行手術(shù)治療時(shí)切除的椎間盤標(biāo)本6例,退變程度Ⅰ級(jí),作為對(duì)照組。利用免疫組織化學(xué)方法研究ChM-Ⅰ在不同退變程度椎間盤組織中的表達(dá)情況。
　　 [結(jié)果]
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5、.RT-PCR和Western blot結(jié)果顯示ChM-Ⅰ在椎間盤髓核細(xì)胞及纖維環(huán)細(xì)胞中均有表達(dá),兩者間在表達(dá)程度上無顯著差異。
　　 2.bFGF可明顯抑制ChM-Ⅰ mRNA和蛋白在髓核細(xì)胞及纖維環(huán)細(xì)胞中的表達(dá),且呈劑量依賴性(P<0.05)。
　　 3.ChM-Ⅰ在對(duì)照組(無退變椎間盤組織)表達(dá)量很低,而在椎間盤發(fā)生退變后其表達(dá)量明顯升高,ChM-Ⅰ在不同退變程度椎間盤組織中的表達(dá)存在顯著差異(P<0.05)。