外源性uPA在兔椎間盤退變中作用的初步研究.pdf

1、目的：通過向兔椎間盤內(nèi)注射不同濃度外源性尿激酶型纖溶酶原激活劑（uPA），觀察其對椎間盤的影響，探討其在椎間盤退變發(fā)病過程中的可能作用。
　　 方法：健康6個月左右大白兔72只,2.5-3Kg，隨機分為實驗組48只，陰性對照組16只，空白對照組8只。實驗組：分為三個亞組，采用腰椎側前方倒八字入路暴露L4/5椎間盤，分別注射濃度為10、20、40 ng/μl的uPA各1μl。陰性對照組（生理鹽水組）：L4/5椎間盤內(nèi)注射1μl的生

2、理鹽水。空白對照組：不作任何處理。手術后分別于第3、6周處死相應各組大白兔取相應椎間盤,進行大體觀察、HE染色、SABC法測基質金屬蛋白酶-3（MMP-3）的表達及蛋白多糖含量測定。
　　 結果:（1）實驗組光鏡下觀察隨著時間和濃度增加，纖維環(huán)排列逐漸紊亂，髓核含水量逐漸減少，色澤也逐漸渾濁。生理鹽水組椎間盤與空白對照組比較沒有明顯變化，都呈正常外觀，纖維環(huán)排列整齊，髓核豐富，色澤透亮。HE染色顯示：空白組椎間盤，纖維環(huán)仍保持著

3、致密的板層結構，細胞成分較多,呈梭形纖維細胞樣或呈軟骨細胞樣。各實驗組隨時間和濃度變化：髄核脊索細胞逐漸減少，并逐漸被纖維軟骨組織替代，纖維環(huán)與髄核之間失去明顯的界限。（2）免疫組化MMP-3表達結果：三周時空白組和生理鹽水組，MMP-3表達陽性率極低，其余實驗組陽性率隨濃度增加而增高，各實驗組與對照組及實驗組之間都有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。六周時MMP-3表達，實驗各組與對照組及實驗各組之間比較有統(tǒng)計學意義（P<0.05），實驗各

4、濃度組與三周時相同濃度組比較也有明顯統(tǒng)計學意義。（3）三周時鹽水組蛋白多糖含量與空白組比較變化不大，各實驗組與空白及鹽水組比較降低明顯（P<0.05）,六周時鹽水組及實驗組與空白對照組髓核蛋白多聚糖比較具有差異性（P<0.05），并且實驗組蛋白多聚糖下降程度與uPA注射劑量及時間呈正相關(P<0.05)。
　　 結論:（1）uPA作為一種細胞外基質的降解酶系，可激活體內(nèi)基質降解系統(tǒng)MMP-3，從而共同促進軟骨降解，椎間盤退變。（