降鈣素對豚鼠椎間盤退變的治療作用.pdf

1、目的:
　　Hartley豚鼠是具有自發(fā)性椎間盤退變（disc degeneration）的動物模型，通過本實驗，可以了解治療骨質(zhì)疏松經(jīng)典藥物降鈣素（Calcitonin, CT）是否對豚鼠自發(fā)性椎間盤退變具有預(yù)防和治療作用。
　　方法:
　　將健康1月齡 SPF級雌性 Hartley豚鼠32只用染料編號并稱重記錄，隨后隨機分為4組：基線組（G1）8只，實驗開始時即處死；對照組（G2）8只，正常飼養(yǎng)至實驗周期3個月時處

2、死；生理鹽水給藥組（G3）8只，正常飼養(yǎng)至實驗周期3個月時開始皮下注射生理鹽水16IU/Kg/2d，生理鹽水給藥組于9個月后處死；降鈣素給藥組（G4）8只，正常飼養(yǎng)至實驗周期3個月時開始皮下注射鮭魚降鈣素16IU/Kg/2d，降鈣素給藥組于9個月后處死。動物處死時留取完整腰椎椎體與腰椎間盤，腰椎間盤行VG染色并用腰椎間盤組織學(xué)評分系統(tǒng)進行評分；骨密度儀分別測量豚鼠腰椎3、4、5椎體骨密度，以及腰椎3-5椎體及其間盤的骨密度；應(yīng)用免疫組織

3、化學(xué)法測量 Col-Ⅱ、MMP-1及 MMP-3在腰椎間盤的表達情況并作定量分析。
　　結(jié)果:
　　1.骨密度檢查結(jié)果顯示：與G1組相比，G2組骨密度明顯升高，G3組骨密度較G1與G2組高（P＜0.05）；經(jīng)降鈣素治療的G4組骨密度明顯高于G3組（P＜0.05）。
　　2.組織學(xué)染色觀察：與G1組相似，G2組沒有出現(xiàn)腰椎間盤退變，G3組較G1與G2組腰椎間盤退變顯著，表現(xiàn)為：髓核內(nèi)出現(xiàn)粘液樣變性且脊索細胞外基質(zhì)較G1組

4、與G2組明顯下降。軟骨終板細胞數(shù)量明顯減少，同時終板骨化程度增加。腰椎間盤組織學(xué)評分結(jié)果顯示：與G1組相比，G2組評分結(jié)果相近，G3組評分結(jié)果顯著高于G1與G2組（P＜0.05）；G4組評分結(jié)果較G3組低（P＜0.05），并且高于G1組與G2組（P＜0.05）。3免疫組織化學(xué)染色結(jié)果： G3組MMP-3及MMP-1陽性表達顯著高于G1組和G2組(P＜0.05)，G4組陽性表達明顯低于G3組；G3組Col-Ⅱ陽性表達均顯著低于G1組與G2