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文檔簡介
1、目的:考察腺病毒載體搭載的重組人組織金屬蛋白酶抑制因子-3基因(RAdTIMP-3)轉(zhuǎn)染兔椎間盤對椎間盤退變的抑制作用。
方法:取30只4月齡日本大白兔,將其隨機(jī)均分入5組。采用可控軸向壓力致兔腰椎間盤退變模型加壓2周以誘發(fā)輕/中度兔椎間盤退變。盤內(nèi)注射不同劑量的藥物:第1組注射20μl 生理鹽水,第2組注射20μl RAd66,第3~5組分別注射20μl,10μl和5μl 濃度為1.0×1010 OPU/ml的RAdTI
2、MP-3。于注射后2周收集各組標(biāo)本,Thompson分級法評價椎間盤退變程度、并行TIMP-3基因RT-PCR、藏紅O-快綠染色、TIMP-3及Ⅱ型膠原免疫組化染色。
結(jié)果:①第3、4、5組Thompson 評分高于第1、2組,其中第3、4組更為顯著。
②RT-PCR顯示,1、2組TIMP-3基因表達(dá)無顯著差異,3、4、5組TIMP-3基因表達(dá)均較1、2組明顯增強(qiáng),第3組較第1組增加最為明顯(t=18.951
3、,p<0.01)。③臧紅O-快綠染色及Ⅱ型膠原免疫組化染色的染色強(qiáng)度均顯示3、4、5組優(yōu)于1、2組。④TIMP-3 免疫組化染色顯示3、4、5組TIMP-3 陽性細(xì)胞率較1、2組明顯增高,第3組陽性細(xì)胞率(79.42±1.35[%])較第1組(25.47±5.46[%])高約311.8[%](χ2=58.413)。
結(jié)論:RAdTIMP-3能夠在退變兔椎間盤內(nèi)高效表達(dá),并能以劑量依賴的形式保護(hù)椎間盤基質(zhì)的降解,抑制椎間盤的
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