強(qiáng)力霉素抑制鼠腰椎間盤退變的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的通過建立腰椎間盤退變動物模型,在強(qiáng)力霉素干預(yù)作用下,應(yīng)用組織病理學(xué)觀察及免疫組化方法檢測退變椎間盤組織中MMP-2、MMP-3的表達(dá),探討該種藥物抑制腰椎間盤退變的可行性及抑制效果,以期為臨床應(yīng)用強(qiáng)力霉素防治腰椎間盤退變提供理論依據(jù)。方法將36只雄性wistar大鼠隨機(jī)平均地分為三組:正常對照組、模型對照組、藥物干預(yù)組。將它們分籠飼養(yǎng),并應(yīng)用經(jīng)腹膜手術(shù),使用21 G針對模型對照組、藥物干預(yù)組實(shí)驗(yàn)大鼠L3/4、L4/5椎間盤纖維環(huán)全層

2、針刺進(jìn)行造模。動物模型建立2周后開始藥物干預(yù),正常對照組、模型對照組不予以任何處理,藥物干預(yù)組每日皮下注射強(qiáng)力霉素25mg/kg.d,持續(xù)2周。動物模型建立4周、8周時,每組隨機(jī)選取6只動物,給予過量速眠新肌肉注射麻醉將其處死,迅速從腰椎后正中線切開皮膚,逐層分離腰椎兩旁的肌肉韌帶,直達(dá)椎體,取下實(shí)驗(yàn)大鼠整個腰椎段,用組織剪刀及鑷子剝離椎間小關(guān)節(jié)和椎體前方的軟組織,分別從L3椎體下緣和L4椎體上緣分離上、下軟骨終板,取出L3/4椎間盤組

3、織。用同樣的方法取出L4/5椎間盤組織,行HE染色及免疫組化染色觀察。結(jié)果術(shù)后4周和8周通過HE染色觀察正常對照組腰椎間盤纖維環(huán)與髓核間有較寬的緩沖帶,界線明顯,髓核呈凝膠樣外觀；模型對照組4周時可以發(fā)現(xiàn)纖維環(huán)與髓核界線稍微模糊,但髓核仍然保持凝膠樣外觀,8周時可以看到腰椎間盤呈破絮狀,有大量不定形物質(zhì),纖維環(huán)與髓核界線不能明確分清,髓核喪失凝膠樣外觀；藥物干預(yù)組則可看到腰椎間盤纖維環(huán)與髓核間有相對于正常組窄的緩沖帶。免疫組化染色觀察正