強(qiáng)力霉素對退變腰椎間盤中MMP-3表達(dá)水平的調(diào)控研究.pdf

1、目的:研究強(qiáng)力霉素對退變腰椎間盤中基質(zhì)金屬蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)表達(dá)水平的調(diào)控作用,為腰椎間盤退變的病人尋找新型藥物治療。
　　方法:1.按隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)將40只大鼠分為對照組和實(shí)驗(yàn)組各20只,制備動物模型,8周后實(shí)驗(yàn)組動物每日皮下注射強(qiáng)力霉素25mg,分早晚兩次注射,對照組動物每日皮下注射等體積的生理鹽水,分早晚兩次注射。2周后取腰椎間盤組織,一部分放置10％中性福爾馬林固

2、定,另一部分存放在液氮中;2.免疫組織化學(xué)檢測:取福爾馬林固定好的樣本應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法檢測腰椎間盤組織中MMP一3的表達(dá),陽性表達(dá)為為棕黃色,主要存在于細(xì)胞漿內(nèi),用Image-Pro Plus6.3軟件測量實(shí)驗(yàn)組和對照組的平均光密度值;3.蛋白印跡實(shí)驗(yàn)(Western—bloting)檢測:用液氮中保存的樣品采用抽提椎間盤髓核的蛋白,轉(zhuǎn)膜后 X線顯影,再在培清 JS-780全自動凝膠圖像分析系統(tǒng)成像,測平均相對含量。
　　結(jié)

3、果:免疫組織化學(xué)檢測中,實(shí)驗(yàn)組大鼠椎間盤組織 MMP~3表達(dá)弱陽性,對照組表達(dá)陽性,測量實(shí)驗(yàn)組和對照組的平均光密度值,實(shí)驗(yàn)組MMP-3表達(dá)較對照組MMP-3表達(dá)低(P<0.01),蛋白印跡實(shí)驗(yàn)(Western—bloting)檢測中,測量成像后MMP-3圖像和相應(yīng)的Actin的比值,將兩者的比值作為MMP-3的相對含量,結(jié)果實(shí)驗(yàn)組MMP-3相對含量較對照組MMP-3相對含量低(P<0.01)。
　　結(jié)論:⒈SD大鼠腰椎退變模型成功