雌激素對去勢雌兔腰椎間盤髓核中IL-20和MMP-3表達影響的實驗研究.pdf

1、目的:在建立雌激素缺乏腰椎間盤退變模型的基礎上,采用雌激素替代療法(ERT)作用于模型動物,應用western-blot和免疫組織化學方法等方法檢測IL-20和MMP-3在腰椎間盤髓核組織中的表達水平,并通過病理、核磁共振、組織電鏡等方法觀察椎間盤組織及超微結(jié)構(gòu)的改變,以初步探討雌激素對退變椎間盤髓核組織IL-20和MMP.3表達的影響及其作用機制。
　　 方法:將32只新西蘭大白兔隨機分為空白對照組(不做任何處理,A組)、實驗

2、空白對照組(單純切除雙側(cè)卵巢,B組)、去勢后小劑量雌激素注射實驗組(C組)、去勢后大劑量雌激素注射實驗組(D組)各8只。動物模型建立一周后,A組和B組隔日肌注生理鹽水2 mL,C組隔日肌注0.2 mg的苯甲酸雌二醇(2mg/ml)；D組隔日肌注1mg的苯甲酸雌二醇(2mg/ml)。3個月后對所有實驗動物行腰椎的核磁共振檢測,之后取腰椎間盤髓核組織,采用免疫組化法和western-blot方法檢測IL-20和MMP-3的表達,并且進行病理

3、、掃描電鏡檢測。
　　 結(jié)果:通過手術(shù)方法成功建立了模仿婦女絕經(jīng)后腰椎問盤退變動物模型,組織病理學結(jié)果退變的椎間盤組織中髓核細胞減少,出現(xiàn)不同程度的退變壞死細胞。透射電鏡顯示退變的椎間盤組織中髓核細胞數(shù)目減少,可見較多壞死殘跡,細胞突起減少或消失,細胞內(nèi)細胞器數(shù)目和糖原顆粒明顯減少。MRI提示B組椎間盤T2加權(quán)像信號減低,A組、C組和D組改變不明顯(P<0.05)。免疫組化和western-blot顯示A組、C組和D組中MMP-