建立大鼠腰椎間盤針刺退變模型的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討纖維環(huán)針刺法誘導(dǎo)建立大鼠腰椎間盤退變動(dòng)物模型的可行性，并通過(guò)影像學(xué)和病理學(xué)檢測(cè)分析，驗(yàn)證針刺誘導(dǎo)退變是一種緩慢進(jìn)展、可重復(fù)性好的大鼠腰椎間盤退變，再現(xiàn)椎間盤退變過(guò)程的客觀發(fā)展規(guī)律，為研究椎間盤退變提供更為理想的動(dòng)物模型，使其適用于研究椎問(wèn)盤退變的病因?qū)W、病理生理學(xué)，并可用于檢驗(yàn)治療椎間盤退變新方法的可行性及療效。 方法：雌性健康Wistar大鼠100只，每只大鼠行脊柱側(cè)位X片，確定入選的大鼠無(wú)脊柱方面疾病。隨機(jī)抽取20

2、只大鼠處死取出L4-5，L5-6椎間盤水平切開(kāi)，測(cè)量纖維環(huán)及前縱韌帶的厚度，二者之和為穿刺深度。剩余80只大鼠動(dòng)物作為模型組，對(duì)每只大鼠L5-6椎間盤用21G穿刺針實(shí)施纖維環(huán)全層針刺1針，旋轉(zhuǎn)360°，停留15 s后拔出。暴露每只大鼠的L4-5椎間盤但不穿刺作為對(duì)照。穿刺完成后逐層縫合，關(guān)閉切口。將術(shù)后80只大鼠隨機(jī)分為2,4，8，12周4個(gè)模型組，每組20只，分籠飼養(yǎng)。術(shù)后2,4，8，12周分別拍X片后將動(dòng)物處死取材。測(cè)算術(shù)前術(shù)后L4

3、-5，L5-6椎間盤高度指數(shù)(Disc Height Index，DHI)及椎間盤高度指數(shù)百分比(％DHI=術(shù)后DHI/術(shù)前DHI×100)，取LA-5，L5-6椎間盤組織行HE染色和免疫組化實(shí)驗(yàn)。 結(jié)果：(1)影像學(xué)分析顯示，術(shù)后第2周到第12周，X線可見(jiàn)實(shí)驗(yàn)組椎間隙變窄，％DHI隨造模時(shí)間延長(zhǎng)而減小，與對(duì)照組相比各時(shí)間段的差異均有顯著性意義(P＜0.05)，軟骨終板和椎體邊緣骨質(zhì)密度增高。(2)病理學(xué)檢測(cè)顯示，HE染色可見(jiàn)對(duì)

4、照組髓核組織中髓核形態(tài)規(guī)則，與纖維環(huán)界線清晰，髓核細(xì)胞較多，纖維環(huán)膠原纖維排列整齊致密；實(shí)驗(yàn)組髓核裂隙形成，膠原排列紊亂，髓核細(xì)胞數(shù)量不斷減少；隨時(shí)間增長(zhǎng)，類軟骨細(xì)胞數(shù)量減少，髓核組織逐漸纖維化，纖維環(huán)逐漸分層紊亂、扭曲、斷裂。各時(shí)間段椎間盤病理組織學(xué)評(píng)分與對(duì)照組相比差異有顯著性意義(P＜0.05)；免疫組化觀察到髓核中Ⅱ型膠原表達(dá)較對(duì)照組逐漸減少(P＜0.05)，而Ⅰ型膠原表達(dá)較對(duì)照組逐漸增多(P＜0.05)。 結(jié)論：(1)本