丹參注射液對(duì)SD大鼠非壓迫腰椎間盤退變的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:通過硬膜外注射制備好的退變椎間盤髓核混懸液來構(gòu)建非壓迫腰椎間盤突出模型,來為臨床試驗(yàn)研究提供一種較簡(jiǎn)便的試驗(yàn)?zāi)Ｐ汀Ｓ玫⒆⑸湟褐委烻D大鼠非壓迫腰椎間盤退變的實(shí)驗(yàn)室研究,為在臨床用中藥化淤止痛治法治療腰腿痛提供理論依據(jù)。通過丹參注射液的療效為中藥制劑治療和預(yù)防腰椎間盤退變等疾病提供理論依據(jù),為臨床進(jìn)一步應(yīng)用丹參等中藥提取物防治本病提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),為腰椎間盤退變中藥的篩選提供新的研究思路及方法。通過丹參注射液對(duì)假膜組和實(shí)驗(yàn)組的臨床觀察

2、和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)結(jié)果的比較,來研究引起退變椎間盤疼痛的根源。
　　方法:采用健康成年的96只SD大鼠隨機(jī)分成4組。正常組:24個(gè),對(duì)照組24只,假模組24只、實(shí)驗(yàn)組24只,建立非壓迫性腰椎間盤退變的模型,正常組不予處理,其余各組均使用醫(yī)用繃帶在生理彎曲范圍內(nèi)將鼠尾折成―U‖型,每日早晚2次,每次1-2小時(shí)。1個(gè)月后,每隔7天分批從正常組、對(duì)照組模型中各選取4只,氯胺酮常規(guī)麻醉、選距鼠尾根部1cm處作為斷點(diǎn),術(shù)區(qū)消毒

3、、鋪無菌洞巾,切斷鼠尾并縫合傷口,注射抗生素抗感染。把鼠尾的皮膚及周圍粘連的韌帶等多余組織清除掉,用生理鹽水予以沖洗干凈,用中性福爾馬林固定液來中浸泡固定成標(biāo)本,放冰箱中冷藏保存24 h后,用手術(shù)刀片切開準(zhǔn)備取的椎間盤,每條尾巴選取3個(gè)椎間盤組織已備切片。然后,把取出的椎間盤依次進(jìn)行脫鈣,用酒精予以遞度脫水,常規(guī)進(jìn)行石蠟包埋、切片,使用HE染色。非壓迫腰椎間盤突出模型造模成功與否由光鏡下椎間盤髓核組織學(xué)觀察來確認(rèn);髓核對(duì)大鼠腫瘤壞死因子

4、-α(TNF-α)及神經(jīng)根損傷的研究,把提取退變的髓核組織移植于假模組和實(shí)驗(yàn)組大鼠的 L4/5神經(jīng)根背側(cè),大鼠非壓迫性髓核突出造模完成。實(shí)驗(yàn)組予以丹參注射液灌胃,假模組不予丹參注射液處理。于第7、15、21天各組分期處死,分別取L4/5周圍的神經(jīng)根處理、切片、染色觀察神經(jīng)根組織形態(tài)學(xué)變化。用人TNF-α試劑盒檢測(cè)各階段腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的變化。
　　結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組神經(jīng)根細(xì)胞變化明顯,少數(shù)神經(jīng)根細(xì)胞空泡變性,細(xì)胞水腫減輕,

5、雪旺細(xì)胞增多,部分核仁消失。丹參注射液可改善損傷神經(jīng)根的組織形態(tài)病理學(xué)改變。實(shí)驗(yàn)組較正常組TNF-α測(cè)定含量升高明顯,說明其是腰椎間盤突出癥疼痛的重要介質(zhì)。實(shí)驗(yàn)組隨治療時(shí)間的延長(zhǎng)而 TNF-α有所下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,t=2.74)
　　結(jié)論:折尾法對(duì)SD大鼠鼠尾反復(fù)持續(xù)的牽張可造成椎間盤內(nèi)組織病理學(xué)的改變。丹參注射液可減輕非壓迫性腰椎間盤退變神經(jīng)根損傷所導(dǎo)致的組織形態(tài)病理學(xué)改變,可以有效減少實(shí)驗(yàn)組大鼠神經(jīng)根的TN