中草藥中遺傳相關(guān)物質(zhì)的分析研究.pdf

1、中草藥中高質(zhì)量DNA的提取和DNA片段的分離分析研究是利用DNA分子標(biāo)記技術(shù)來鑒別中藥材的兩個基礎(chǔ)研究。本文主要探索了中草藥中高質(zhì)量DNA的快速提取方法和毛細(xì)管電泳在DNA片段分離中的應(yīng)用，為以后的毛細(xì)管電泳應(yīng)用于中草藥中遺傳相關(guān)物質(zhì)的研究提供實驗依據(jù)。另外，本文還建立了新的膠束電動毛細(xì)管色譜法，為快速、高效地檢測藥物中的生物堿基含量提供了一種新方法。 本文主要做了以下工作： 1．首先探討出了一種簡便可行的何首烏高質(zhì)量D

2、NA的提取方法，再將該方法分別用于車前草、紅車軸草、黃芩、博落回和紫錐菊DNA的提取，然后用大孔吸附樹脂對不純DNA進行了純化分離，目的是探索出一種較廣泛適用的中藥材DNA分離純化方法。結(jié)果表明所探討的方法可用于何首烏高質(zhì)量DNA的提取，大孔吸附樹脂對不純DNA有一定的純化作用。 2．通過優(yōu)化DNA提取各步驟，獲得了一種快速的赤芍干葉片完整、高質(zhì)量DNA的提取方法，并成功應(yīng)用于四個產(chǎn)地赤芍DNA的PCR分析比較。 3．以

3、羥丙基甲基纖維素和聚乙烯吡咯烷酮作為篩分介質(zhì)，采用無膠篩分毛細(xì)管電泳法分離了λDNA HindШ中的7個片段和λDNA/EcoR I+HindШ中的12個片段，結(jié)果較好，并成功應(yīng)用于藥用植物何首烏DNA樣品的分析。 4．以35 mmol·L-1SDS-10 mmol·L-1硼砂(pH9.0)作緩沖溶液，采用膠束電動毛細(xì)管色譜法，8 min內(nèi)分離和測定了腺嘌呤、鳥嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶、茶堿和咖啡因6種生物堿基，并且成功應(yīng)用于去痛