中華紅葉楊無菌繁殖體系建立的影響因素研究.pdf

1、本研究對中華紅葉楊無菌繁殖體系建立過程中外植體消毒方式及導致褐變發(fā)生的影響因素進行了研究。 選用0.15％的氯化汞、2％的次氯酸鈉、30mg/L的抗生素溶液分別對中華紅葉楊的莖段和葉片進行消毒，在消毒過程中，三種消毒劑又分別設置了不同的消毒時間，然后都接種于同種培養(yǎng)基上，統(tǒng)計其污染率并觀察其生長狀況。結果表明：莖段用0.15％的氯化汞消毒10分鐘，污染率少，生長狀況良好；用2％的次氯酸鈉消毒20分鐘，污染率很高，外植體前期生長狀

2、況優(yōu)于用氯化汞消毒的外植體;抗生素在30分鐘內起不到消毒的效果。葉片用0.15％的氯化汞消毒8分鐘，污染率小，生長狀況良好；用2％的次氯酸鈉消毒12分鐘，污染率高，但生長狀況較好；抗生素在20分鐘內達不到對葉片消毒的效果。 對影響外植體褐化的不同因素做了研究。在預處理對外植體褐化的影響中，外植體低溫預處理并與簡單培養(yǎng)基培養(yǎng)相結合的方法，外植體的褐化率低，抑制褐化效果好；外植體表面消毒前用PVP和Vc混合液分別振蕩處理，也能明顯地

3、降低褐化率，但以Vc混合液振蕩處理效果好。 在培養(yǎng)基對褐化的影響中，pH值對褐化率有明顯影響，其影響趨勢是：在一定pH值范圍(5.0～6.5)內，pH值越低，褐化率越低；無機鹽濃度影響外植體的褐化率，表現(xiàn)為：無機鹽濃度低，褐化率低；在瓊脂濃度5.0～6.5g/L范圍內，瓊脂濃度越大，培養(yǎng)基越硬，褐化率越低；低蔗糖濃度有利于降低褐化率，本試驗中以2％蔗糖濃度培養(yǎng)下的外植體褐化率最低；活性炭對褐化率有明顯影響，但其濃度要適宜，以每升