妊娠期糖尿病大鼠胎肺血管發(fā)育及VEGF、PEDF表達(dá)的研究.pdf

1、目的:探討GDM（GDM）對(duì)大鼠胎肺血管發(fā)育的影響，為GDM的母嬰綜合治療提供進(jìn)一步的理論依據(jù)。
　　方法:
　　1、建立 GDM動(dòng)物模型：采用化學(xué)藥物誘導(dǎo)法。選取20只 SPF級(jí)Sprague-Dawley（SD）雌性大鼠，以雄雌1:2比例合籠過(guò)夜，次晨陰道涂片鏡檢發(fā)現(xiàn)精子者確定為懷孕，記為妊娠第0天。采用隨機(jī)數(shù)字法將孕鼠隨機(jī)分為2組：GDM組和對(duì)照組。GDM組于妊娠第6天一次性單側(cè)腹腔注射1％ STZ（溶于檸檬酸鈉緩沖液

2、，0.1mol/L,pH4.4）45mg/kg體重，孕鼠注射3天后有糖尿病表現(xiàn)且連續(xù)監(jiān)測(cè)血糖均大于11.1mmol/L表示建模成功；對(duì)照組孕鼠在妊娠同一天同一側(cè)進(jìn)行一次性單側(cè)腹腔注射等量檸檬酸緩沖液。兩組孕鼠分別于妊娠第9天、第12天、第15天、第18天進(jìn)行稱重、測(cè)尾靜脈血糖，妊娠第18天進(jìn)行剖宮產(chǎn)術(shù)取出胎鼠肺組織。
　　2、應(yīng)用蘇木素-伊紅（HE）染色觀察兩組大鼠胎肺形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)育情況，形態(tài)定量學(xué)方法分析肺泡數(shù)量、肺泡間隔厚度和平

3、均每視野肺泡表面積。
　　3、采用免疫組化SP法檢測(cè)兩組大鼠胎肺組織中血小板-內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子-1（PECAM-1/CD31)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）及色素上皮衍生因子（PEDF）的表達(dá)情況。
　　4、SPSS18.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果:
　　1、GDM組和對(duì)照組孕鼠癥狀表現(xiàn)及血糖變化：GDM組孕鼠在注射藥物3天后開始出現(xiàn)多尿、多飲、多食、精神反應(yīng)差、活動(dòng)減少等糖尿病癥狀，對(duì)照組無(wú)明顯

4、上述糖尿病癥狀。GDM組孕鼠體重在妊娠第9天以后明顯低于對(duì)照組孕鼠體重，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；GDM組孕鼠血糖在妊娠第9天后明顯高于對(duì)照組孕鼠血糖，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2、GDM組和對(duì)照組大鼠胎肺組織 HE染色結(jié)果：光鏡下，GDM組大鼠胎肺肺泡數(shù)目較少，肺泡腔結(jié)構(gòu)小，肺泡間隔厚，周圍結(jié)締組織致密；對(duì)照組大鼠胎肺肺泡數(shù)目多，肺泡腔大，肺泡間隔薄，周圍結(jié)締組織少。形態(tài)定量學(xué)分析結(jié)果示：GDM組和對(duì)照組大鼠胎肺肺泡數(shù)分別為47.77±4

5、.75個(gè)、55.67±7.85個(gè)；肺泡間隔厚度分別是8.60±1.28μm、6.93±0.57μm；平均每視野肺泡面積分別為189.75±33.12μm2、225.97±36.06μm2；GDM組大鼠胎肺肺泡數(shù)較對(duì)照組少，平均每視野肺泡面積較對(duì)照組小，肺泡間隔較對(duì)照組厚，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3、GDM組和對(duì)照組大鼠胎肺組織CD31、VEGF及PEDF的表達(dá)情況：妊娠第18天時(shí)，大鼠胎肺組織還尚未見到完整血管腔結(jié)構(gòu)形成。CD3

6、1主要定位于鄰近肺泡腔的血管內(nèi)皮間充質(zhì)細(xì)胞胞膜上，VEGF和PEDF主要定位于肺支氣管上皮細(xì)胞的胞漿或胞膜上，呈棕黃色。GDM組大鼠胎肺組織CD31、VEGF平均光密度值為0.428±0.016,0.423±0.015；對(duì)照組大鼠胎肺組織 CD31、VEGF平均光密度值為0.340±0.006,0.382±0.012，GDM組大鼠胎肺組織CD31、VEGF平均光密度值較對(duì)照組高；GDM組大鼠胎肺組織PEDF平均光密度值為0.308±0.

7、014；對(duì)照組大鼠胎肺組織PEDF平均光密度值為0.371±0.021，GDM組大鼠胎肺組織PEDF平均光密度值較對(duì)照組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)CD31、VEGF及PEDF兩兩因子的平均光密度值進(jìn)行相關(guān)性分析結(jié)果示：對(duì)照組和GDM組大鼠胎肺組織中PEDF表達(dá)與 VEGF及 CD31均呈負(fù)相關(guān)；對(duì)照組和GDM組大鼠胎肺組織中VEGF表達(dá)與 CD31均呈正相關(guān)。
　　結(jié)論:
　　1、GDM動(dòng)物模型建立成功；
　　2、GDM