乳腺癌組織中ABCG2、HIF-1α的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、腫瘤的多藥耐藥是化療失敗的主要原因，耐藥泵的產(chǎn)生是形成多藥耐藥的重要機(jī)制之一，其中，乳腺癌耐藥相關(guān)蛋白(Breast cancer resistant protein BCRPABCG2)是較晚發(fā)現(xiàn)的藥泵蛋白。蒽環(huán)類藥物是ABCG2的底物，而葸環(huán)類藥物恰恰是乳腺癌治療中的常用藥，所以研究ABCG2與葸環(huán)類藥物應(yīng)用的關(guān)系對于乳腺癌的治療意義重大。 缺氧誘導(dǎo)因子-1(Hypoxia inducible factor-1，HIF-1)

2、與多藥耐藥關(guān)系非常密切。已有研究證實(shí)，HIF-1可以上調(diào)P-gP，MRP的表達(dá)，而且，與P-gp相似，在ABCG2啟動子中也存在HIF-1的結(jié)合基序(binding motifs)，這強(qiáng)烈提示了HIF-1可能調(diào)節(jié)ABCG2的表達(dá)。 本研究采用免疫組織化學(xué)SP法對乳腺癌組織HIF-1α，ABCG2的表達(dá)進(jìn)行檢測，并結(jié)合完整的臨床、隨訪資料，分析它們之間的關(guān)系及HIF-lα，ABCG2與臨床特點(diǎn)，無病生存的關(guān)系。 實(shí)驗(yàn)方法:

3、 1、病例和標(biāo)本 122例乳腺癌組織石蠟標(biāo)本來自于中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一臨床學(xué)院接受乳腺癌手術(shù)治療的病人?；颊咝g(shù)前均未接受放療或化療，術(shù)后106例接受了以蒽環(huán)類化療藥為主的輔助化療，入選病例均為女性，平均年齡50.2歲，腫塊≤2cm者32例(26.2％)，發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移66例(54.1％)，臨床TNM分期Ⅲ期患者34例(27.9％)，病理類型為浸潤性導(dǎo)管癌88例(72.1％)。從手術(shù)日期到復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移或隨訪截止日期(2006年

4、12月)確定為患者無病生存期(DFS)，為6～59個(gè)月，平均32.2個(gè)月，共有32例(26.2％)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移病例。122例乳腺癌癌組織取15例正常乳腺組織作為對照。 2、試劑 ABCG2單克隆抗體、SP檢測試劑盒和DAB顯色劑購自福建邁新生物技術(shù)有限公司，HIF-1α多克隆抗體購自武漢博士德生物技術(shù)有限公司。 3、方法 乳腺癌組織芯片制作。采用免疫組化SP法，按照SP檢測試劑盒說明書所示步驟進(jìn)行，切片經(jīng)檸檬

5、酸緩沖液(PH=6.0)高壓熱修復(fù)預(yù)處理。 4、結(jié)果判定 ABCG2的判定以胞膜上出現(xiàn)棕黃色顆粒為顯色，選取5個(gè)高倍鏡視野(X400)作陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)，以陽性細(xì)胞數(shù)≤10％為陰性，>10％為陽性；HIF-1α以胞核或胞漿內(nèi)有棕黃色或棕褐色細(xì)顆粒為陽性表達(dá)，陽性細(xì)胞數(shù)≤10％為陰性，>10％為陽性。 5、統(tǒng)計(jì)分析方法采用SPSS13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，率的比較采用卡方檢驗(yàn)；ABCG2和HIF-lα表達(dá)的相關(guān)性采用S

6、pearman秩和相關(guān)分析；無病生存數(shù)據(jù)分析采用Kaplan-Meier法，組間比較采用Log rank檢驗(yàn)；P<0．05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，所有檢驗(yàn)和P值均為雙側(cè)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果: 1、ABCG2、HIF-1α在乳腺癌組織中的表達(dá)及相關(guān)性122例乳腺癌組織ABCG2、HIF-1α的陽性表達(dá)率分別為40.2％、59.0％， 15例正常乳腺組織未檢出ABCG2、HIF-1α表達(dá)。ABCG2與HIF-1α的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.21，

7、p=0.03)。 2、ABCG2、HIF-1α表達(dá)與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，ABCG2表達(dá)與腫塊大小(r=0.21，p=0.02)呈正相關(guān)；HIF-1α表達(dá)與腫塊大小(r=0.33，p<0.01)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(r=0.25，p<0.01)、臨床分期(r=0.21，p=0.022)呈正相關(guān)。 3、乳腺癌組織ABCG2、HIF-1α表達(dá)與無病生存期的關(guān)系經(jīng)Kaplan-Meier生存曲線分析，ABCG2表達(dá)與1

8、22例患者的無病生存期有負(fù)相關(guān)趨勢，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.052)，與106例接受了以蒽環(huán)類化療藥為主的輔助化療患者的無病生存期呈負(fù)相關(guān)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.033)。HIF-1α表達(dá)與122例患者的無病生存期呈負(fù)相關(guān)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.030)。HIF-1α與ABCG2共表達(dá)與122例患者的無病生存期呈負(fù)相關(guān)，有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.004)。 結(jié)論: 1、ABCG2表達(dá)陽性是接受了以蒽環(huán)類化療藥為主的輔助化療