可溶性CD40配體對(duì)THP-1細(xì)胞株增殖及Bcl-2、P53 mRNA表達(dá)的影響.pdf

1、目的:探討可溶性CD40配體(sCD40L)對(duì)人急性單核細(xì)胞白血病THP-1細(xì)胞株增殖、凋亡以及凋亡相關(guān)基因BCL-2、P53 mRNA表達(dá)的影響。
　　方法:(1)采用CCK-8法檢測(cè)不同濃度sCD40L對(duì)急性單核細(xì)胞白血病 THP-1細(xì)胞株體外增殖的影響,確定最佳干預(yù)濃度;(2)采用Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡;(3)通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)sCD40L對(duì)THP-1細(xì)胞BCL-2、P53mRNA表達(dá)

2、的影響。
　　結(jié)果:(1)不同濃度sCD40L對(duì)THP-1細(xì)胞作用24h、48h、72h小時(shí)后均有不同程度的抑制的作用,與細(xì)胞對(duì)照組相比較,均有顯著差異(p<0.05),其中濃度為4μg/ml對(duì)急性單核細(xì)胞白血病 THP-1細(xì)胞抑制作用最明顯;同一濃度、不同作用時(shí)間下,72h抑制作用最明顯。(2)AnnexinV-FITC/PI雙染色顯示,THP-1細(xì)胞與sCD40L組共育24h、48h、72h后,均見明顯凋亡,與THP-1細(xì)胞對(duì)

3、照組相比較有顯著差異(P<0.05)。同一濃度、不同時(shí)間下,在72h時(shí)對(duì)THP-1細(xì)胞凋亡最明顯;(3)實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè)定結(jié)果顯示:在同一時(shí)間內(nèi)sCD40L4.00μg/ml組與細(xì)胞對(duì)照組相比較,Bcl-2mRNA的表達(dá)量明顯下調(diào),而P53 mRNA的表達(dá)明顯上調(diào),且與細(xì)胞對(duì)照組相比較均有顯著差異(P﹤0.05);在不同時(shí)間內(nèi),兩種基因的表達(dá)量與時(shí)間有相關(guān)性。
　　結(jié)論:(1) sCD40L在體外能夠抑制THP-1細(xì)胞增殖,誘