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1、熱帶生態(tài)型龍眼品種四季蜜具有一年多次開花結(jié)果特性,應(yīng)用春季修剪結(jié)合外施生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑可調(diào)控四季蜜龍眼夏季集中成花,然而其生理及分子調(diào)控機(jī)理的研究較少。為此本試驗(yàn)首先探討四季蜜龍眼夏季成花調(diào)控過程中可溶性糖、淀粉、可溶性蛋白、游離氨基酸以及異戊烯基腺嘌呤[N6-(2-Isopentenyl)adenosine(IPA)]、吲哚乙酸[Indolylacetic acid(IAA)]、脫落酸[Abscisic acid(ABA)]、赤霉素[Gib
2、rellic acid(GA)]的變化,其次通過同源克隆獲得四季蜜龍眼重要開花基因FLOWERING LOCUST(FT),并分析其表達(dá)模式和功能,以期從生理和分子生物學(xué)水平上初步探明生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑調(diào)控四季蜜龍眼夏季成花的機(jī)理。本研究將為四季蜜龍眼的花期調(diào)控和產(chǎn)期調(diào)節(jié)提供理論指導(dǎo)。主要研究結(jié)果如下:
(1)四季蜜龍眼結(jié)果母枝單元末次梢葉片淺綠色、芽尚未伸長(zhǎng)生長(zhǎng)時(shí),向葉面噴布126.9 mg/L乙烯利+500 mg/L多效唑混合液,
3、7d后噴布126.9 mg/L乙烯利+250mg多效唑混合液,能促進(jìn)四季蜜龍眼夏季集中成花,成花株率為100%,成花枝率為98.4%。
(2)多效唑和乙烯利處理增加葉片IPA、ABA的含量,降低了葉片中GA的含量。高水平的IPA、低水平的GA以及較高水平的IAA、ABA有助于四季蜜龍眼花芽分化。
(3)多效唑和乙烯利處理增加了樹體內(nèi)IPA/IAA的比值,葉片中較高IPA/IAA比值可以抑制樹體的營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng),有效地促進(jìn)花
4、芽分化。
(4)四季蜜龍眼成花過程中較高含量的碳水化合物有利于成花,葉片中C/N比值高促進(jìn)花芽分化。
(5)本試驗(yàn)克隆獲得了兩個(gè)四季蜜龍眼FT同源基因cDNA全長(zhǎng),分別命名為DlFT1和DlFT2。分析表明DlFT1和DlFT2開放閱讀框(ORF)都為525 bp,各編碼174個(gè)氨基酸,兩者所編碼的蛋白質(zhì)存在24個(gè)氨基酸殘基的差異。DlFT1和DlFT2同其它物種的FT同源基因高度保守,并且在蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)以及結(jié)構(gòu)域
5、上高度相似,推測(cè)它們的功能相似。
根據(jù)實(shí)時(shí)熒光定量結(jié)果推測(cè):葉片中DlFT1和DlFT2在PP333和乙烯利誘導(dǎo)四季蜜龍眼成花轉(zhuǎn)變的過程中可能起較大作用,且DlFT2的表達(dá)量顯著上升,推測(cè)DlFT2與成花緊密相關(guān)。同時(shí)成功構(gòu)建了過量表達(dá)載體pBI121-DlFT1和pBI121-DlFT2,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的花粉管導(dǎo)入法轉(zhuǎn)化擬南芥,收獲T0代種子,為今后基因功能驗(yàn)證以及進(jìn)一步探明生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑調(diào)控四季蜜龍眼夏季成花的分子機(jī)制打下了一
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