微囊藻毒素對小鼠生殖系統(tǒng)的影響.pdf

1、微囊藻毒素(microcystins，MCs)是一類具有生物活性的環(huán)狀七肽肝毒素，具有明顯的肝毒性，主要由銅綠微囊藻(Microcystis aeruginosa)產(chǎn)生。它是細(xì)胞內(nèi)毒素，在藍藻細(xì)胞死亡裂解后釋放進水體內(nèi)。近幾十年，國內(nèi)外關(guān)于微囊藻毒素危害野生動物、家畜、家禽的事件時有發(fā)生；同時，由有毒水華微囊藻或微囊藻毒素所引發(fā)的肝炎、肝癌及其它中毒事件也有一些報道。但微囊藻毒素對小鼠的生殖毒性研究目前只有很少的報道。本文主要研究了微囊

2、藻毒素對小鼠的生殖毒性作用，為進一步研究MC對人類生殖健康可能的危害提供理論基礎(chǔ)和參考數(shù)據(jù)。 實驗用微囊藻采自河南省南灣水庫，通過分離獲得純種，然后進行大量培養(yǎng)。收集藻漿，用沸水浴法提取微囊藻細(xì)胞抽提液。細(xì)胞抽提液經(jīng)甲醇抽提、C18固相萃取柱初步純化得到微囊藻毒素粗品。通過急性毒性實驗獲得微囊藻粗毒素和微囊藻細(xì)胞抽提液對小鼠的LD50。采用腹腔注射方法對小鼠染毒，結(jié)果發(fā)現(xiàn)微囊藻毒素的LD50為44.53(95％可信限42.60～

3、46.62)μg/kg體重，而微囊藻細(xì)胞抽提液LD50為40.99(95％可信限38.99～43.15)μg/kg體重。在亞慢性毒性實驗中，分別用1/5 LD50劑量微囊藻毒素和1/5 LD50劑量的微囊藻細(xì)胞抽提液對小鼠連續(xù)腹腔注射染毒21 d。末次染毒24h后取材，檢測小鼠的體重、睪丸重量、血清睪酮濃度和睪丸組織結(jié)構(gòu)損傷。染毒1d、3d、7d、21d分別取材，檢測睪丸標(biāo)志性酶活性。另外，在亞急性毒性實驗中，用1/2 LD50劑量微囊

4、藻毒素和1/2 LD50劑量的微囊藻細(xì)胞抽提液對小鼠連續(xù)染毒5d，繼續(xù)喂養(yǎng)至第一次染毒后35 d檢測精子畸形率。主要的實驗結(jié)果如下： (1)亞慢性腹腔注射染毒21 d后，通過檢測發(fā)現(xiàn)，微囊藻毒素和細(xì)胞抽提液處理組小鼠體重顯著性下降，其原因可能是由于MC染毒后，MC影響了小鼠體內(nèi)的一些代謝平衡，從而導(dǎo)致小鼠的體重降低。同時還發(fā)現(xiàn)，微囊藻毒素和細(xì)胞抽提液組小鼠睪丸重量顯著性下降。另外，在組織學(xué)檢測中發(fā)現(xiàn)，微囊藻毒素和微囊藻細(xì)胞抽提液

5、損傷了小鼠睪丸組織結(jié)構(gòu)，使精細(xì)胞時相發(fā)生變化，并打亂了曲精小管的細(xì)胞層次。這可能是因為微囊藻毒素通過血睪屏障，損傷了小鼠睪丸的正常結(jié)構(gòu)并影響其正常機能。 (2)亞慢性腹腔注射染毒7 d，微囊藻毒素和細(xì)胞抽提液對小鼠睪丸標(biāo)志酶(乳酸脫氫酶、乳酸脫氫酶-X、酸性磷酸酶和山梨醇脫氫酶)無顯著性影響，微囊藻毒素和細(xì)胞抽提液的暴露21 d后，則顯著提高了小鼠睪丸標(biāo)志酶的活性，可能是因為微囊藻毒素干擾小鼠某些代謝途徑，從而影響精子的發(fā)生和成