細(xì)胞因子IL-17和IL-4及Tc1-Tc2失衡在強(qiáng)直性脊柱炎發(fā)病中的作用.pdf

1、目的：強(qiáng)直性脊柱炎(Ankylosing Spondylitis,AS)是一種慢性進(jìn)行性炎性疾病。其發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，雖然目前認(rèn)為與免疫、感染及遺傳因子HLA-B27相關(guān)，但至今未完全明確。研究發(fā)現(xiàn)T淋巴細(xì)胞中的CD4<'+>T輔助細(xì)胞(Th細(xì)胞)和CD8<'+>T殺傷細(xì)胞(Tc細(xì)胞)及其分泌的細(xì)胞因子在AS的發(fā)病過程中扮演著極其重要的角色。依據(jù)分泌細(xì)胞因子的不同Th分為Th1和Th2亞群，Tc分為Tc1和Tc2亞群。IL-17由Th1

2、和Tc1產(chǎn)生，是T細(xì)胞誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)的早期啟動因子；IL-4由Th2和Tc2產(chǎn)生，其主要功能為抑制細(xì)胞免疫，促進(jìn)體液免疫。有資料顯示AS的發(fā)病關(guān)鍵可能是Tc細(xì)胞的活化，甚至無需Th細(xì)胞的參與，研究發(fā)現(xiàn)敲除CD4基因的小鼠仍可發(fā)生AS充分證明了其正確性。T淋巴細(xì)胞異?；罨笸ㄟ^分泌不同的細(xì)胞因子來發(fā)揮致病作用。研究證實(shí)，AS關(guān)節(jié)內(nèi)存在識別細(xì)菌也識別自身抗體的Tc細(xì)胞，有學(xué)者認(rèn)為Tc1/Tc2平衡失調(diào)是導(dǎo)致AS發(fā)生的關(guān)鍵，但有關(guān)這方面的研究

3、還鮮有報(bào)道。因此本實(shí)驗(yàn)通過檢測AS患者血清及關(guān)節(jié)液中細(xì)胞因子IL-17和IL-4的水平以及外周血Tc1/Tc2的失衡，探討細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的變化及Tc1/Tc2的平衡失調(diào)在AS的發(fā)病機(jī)制中的作用，并為該病臨床治療方案的選擇提供一定的理論依據(jù)。 方法：選取強(qiáng)直性脊柱炎患者30例，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis RA)患者20例，所選患者均為初治者，既往均不曾應(yīng)用甲氨蝶呤(MTX)、柳氮磺吡啶(SASP)等慢作用

4、抗風(fēng)濕藥及生物制劑。AS患者均符合1984年修訂的紐約標(biāo)準(zhǔn)，RA患者均符合1987年美國風(fēng)濕病學(xué)學(xué)會(ARA)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎診斷標(biāo)準(zhǔn)；并選取20名健康查體者為對照組。記錄AS患者的血沉(ESR)、C-反應(yīng)蛋白(CRP)及病程、首發(fā)癥狀，并攝骶髂關(guān)節(jié)CT觀查放射學(xué)改變分級。留取AS組、RA組和健康對照組血清及AS患者關(guān)節(jié)液。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ABC-EKISA)檢測血清及關(guān)節(jié)積液中IL-17及IL-4的水平。留取AS患者和健康對

5、照組的新鮮肝素鈉抗凝全血，以流式細(xì)胞儀(FCM)檢測外周T淋巴細(xì)胞表型CD3、CD8(代表Tc細(xì)胞)及其胞漿內(nèi)細(xì)胞因子IFN-γ(代表Tc1細(xì)胞)和IL-4的表達(dá)(代表Tc2細(xì)胞)。AS患者血清IL-17和IL-4水平及Tc1、Tc2、Tc1/Tc2比值分別與ESR、CRP進(jìn)行相關(guān)性分析。采用SAS8.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理。所有計(jì)量資料數(shù)均以(x±s)表示，兩組間比較采用兩樣本均數(shù)比較的t檢驗(yàn)，相關(guān)性檢驗(yàn)采用直線相關(guān)，P<0.05

6、，則認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果：1 AS患者血清中IL-17的含量(16.46±8.62)ng/L較正常對照組(9.51±2.97)ng/L明顯升高；AS患者血清中IL-4的含量(6.94±4.13)ng/L較正常對照組(17.81±4.69)ng/L顯著降低，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。RA患者血清中IL-17的含量(15.01±4.38)ng/L較正常對照組(9.51±2.97)ng/L明顯升高，差異具有顯著意義

7、(P<0.05)；RA患者血清中IL-4的含量(21.91±13.25)ng/L較正常對照組(17.81± 4.69)ng/L，無明顯變化，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。AS血清中IL-17的含量與RA無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；AS患者血清中IL-4的含量較RA患者顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 2 AS患者關(guān)節(jié)液中的IL-17含量(32.6±9.97)ng/L，比血清中的含量(16.46±8.62)ng

8、/L明顯升高(P<0.05)；AS關(guān)節(jié)液中IL-4的含量(17.70±6.55)ng/L，較血清中的含量(6.94±4.13)ng/L顯著升高(P<0.05)。 3 AS患者外周血中CD3<'+>CD8<'+>T細(xì)胞百分?jǐn)?shù)(23.74±6.81)％較正常對照組(17.55±3.89)％明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；AS患者外周血中Tel細(xì)胞百分?jǐn)?shù)(0.38±0.38)％較正常對照組(1.58±1.57)％明顯降低

9、，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；AS患者外周血中Tc2細(xì)胞百分?jǐn)?shù)(0.59±0.61)％與正常對照組(0.46±0.28)％無明顯差異(P>0.05)。AS患者Tc1/Tc2為(0.77±2.01)較正常對照(4.07±3.88)明顯減低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 4 AS患者血清中IL-17水平與炎癥活動指標(biāo)(ESR和CRP)無明顯相關(guān)性(r=-0.3857、0.1317，P>0.05)；IL-4含量與ESR

10、成顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.6467，P<0.01)，IL-4水平與CRP無明顯相關(guān)性(r=0.2797，P>0.05)：AS患者血清中Tc1、Tc2百分?jǐn)?shù)及Tc1/Tc2比值與ESR和CRP均無明顯的相關(guān)性(r=-0.0717、-0.2396、0.1223、-0.3312、-0.0549、-0.2358，P>0.05)。 結(jié)論：1 AS患者體內(nèi)的確存在免疫功能紊亂，血清中促進(jìn)炎癥發(fā)展的細(xì)胞因子IL-17含量明顯增高，而抑制炎癥反應(yīng)

11、的細(xì)胞因子IL-4水平顯著降低，說明這兩種細(xì)胞因子含量的變化在AS的發(fā)病過程中起著重要的作用。RA患者血清中同樣存在高水平的IL-17，表明IL-17與RA的發(fā)生關(guān)系密切。 2 AS患者關(guān)節(jié)液中存在高水平IL-17和IL-4，均高于血清水平，說明IL-17和IL-4有向關(guān)節(jié)局部炎癥部位聚集的傾向，與AS的關(guān)節(jié)滑膜病變和骨質(zhì)破壞的發(fā)生密切相關(guān)。 3 AS患者外周血中Tc1細(xì)胞減少，Tc2細(xì)胞無明顯變化，的確存在Tc1/T