在啤酒糖化過程中提高極限糊精酶活力的研究.pdf

1、考察取自青島啤酒公司的大麥芽淀粉酶活性與糖化產(chǎn)物，發(fā)現(xiàn)不同品種的麥芽其淀粉酶系組成、糖化產(chǎn)物組成均不同。為研究淀粉酶系對(duì)糖化產(chǎn)物的影響，首先考察α-淀粉酶、β-淀粉酶對(duì)淀粉的酶解作用，及兩種淀粉酶在對(duì)淀粉的降解過程中的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)α-淀粉酶與β-淀粉酶比例在適當(dāng)范圍內(nèi)的增減對(duì)淀粉酶解過程可以起到相互彌補(bǔ)作用。進(jìn)一步考察α-淀粉酶、β-淀粉酶、極限糊精酶淀粉酶系對(duì)淀粉的降解作用，發(fā)現(xiàn)對(duì)于一定比例的α-淀粉酶、β-淀粉酶組合，添加極限糊精酶能

2、顯著增加可發(fā)酵性糖生成。 研究大麥中蛋白酶、巰基蛋白酶在發(fā)芽過程中的分泌規(guī)律，以及發(fā)芽過程中添加金屬離子時(shí)蛋白酶、巰基蛋白酶的分泌規(guī)律。同時(shí)，對(duì)大麥發(fā)芽以及麥芽焙焦過程中極限糊精酶分泌規(guī)律進(jìn)行研究，結(jié)合自由態(tài)極限糊精酶從結(jié)合態(tài)釋放的兩種假設(shè)，對(duì)離體狀態(tài)下極限糊精酶酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行研究。發(fā)現(xiàn)發(fā)芽過程中蛋白酶產(chǎn)生周期較長；而巰基蛋白酶產(chǎn)生和變化較大。極限糊精酶在發(fā)芽4-6天以結(jié)合態(tài)極限糊精酶為主；后期自由態(tài)極限糊精酶增加，發(fā)芽至9天時(shí)，

3、自由態(tài)極限糊精酶占總的極限糊精酶的70％之多。發(fā)芽5天的綠麥芽經(jīng)焙焦處理后得到的成品麥芽與5天發(fā)芽的綠麥芽相比，自由態(tài)在總極限糊精酶中所占比率從發(fā)芽5天的綠麥芽的32.8％降低到焙焦麥芽的20.9％；而結(jié)合態(tài)在總極限糊精酶中所占比率從發(fā)芽5天的綠麥芽的67.2％增加到焙焦麥芽的78.9％。自由態(tài)的極限糊精酶耐熱性不如結(jié)合態(tài)的極限糊精酶。提取極限糊精酶時(shí)在緩沖液中加還原劑L-CYS引起的自由態(tài)極限糊精酶活性增加，是由于L-CYS激活了麥芽

4、中的巰基蛋白酶，巰基蛋白酶通過蛋白修飾將結(jié)合態(tài)的極限糊精酶釋放，引起自由態(tài)極限糊精酶的增多，證明了利用巰基蛋白酶調(diào)控實(shí)現(xiàn)提高極限糊精酶活性的可能性。 為了獲得高純度、高比活的極限糊精酶抑制因子產(chǎn)品，我們以麥芽粉為原料，用醋酸鈉緩沖液浸提液進(jìn)行分離純化。利用CM纖維離子交換柱層析和凝膠過濾層析對(duì)極限糊精酶抑制因子進(jìn)行分離提純，用極限糊精酶經(jīng)極限糊精酶抑制因子作用后所測(cè)出的極限糊精酶活力的減少的量，表示極限糊精酶抑制因子的活力值。最