激素性兒童股骨頭缺血性壞死動物模型的建立及病因初探.pdf

1、目的：建立糖皮質(zhì)激素幼兔股骨頭缺血壞死模型，觀察糖皮質(zhì)激素受體在股骨頭組織中的表達(dá)，探討兒童股骨頭缺血壞死可能的發(fā)病原因。
　　 方法：選用2月齡的新西蘭大白兔60只，雌雄各半，體重1.4～1.7kg。隨機(jī)分為兩組，激素注射組48只，臀肌注射糖皮質(zhì)激素(7.5mg/kg)，每周兩次，共8周。對照組12只，臀肌注射等體積的生理鹽水(0.3ml/kg)，每周兩次，共8周。于第一次注射后第2、4、6、8周行雙髖關(guān)節(jié)X線正位片、CT掃描

2、檢查，于第一次注射后第2、4、6周末分別處死激素注射組實驗動物4只、對照組實驗動物2只，剩余實驗動物于第一次注射后第8周末處死，分別取雙側(cè)股骨頭軟骨、軟骨下骨質(zhì)行組織病理學(xué)、透射電鏡檢查，免疫組織化學(xué)法檢測糖皮質(zhì)激素受體的表達(dá)并進(jìn)行圖像分析，Tunel技術(shù)檢測骨細(xì)胞凋亡情況。根據(jù)是否發(fā)病將激素注射組分為激素注射發(fā)病組和激素注射未發(fā)病組(診斷采用日本骨壞死多中心協(xié)會提出的標(biāo)準(zhǔn)化股骨頭非創(chuàng)傷性壞死的診斷標(biāo)準(zhǔn))，比較糖皮質(zhì)激素受體在發(fā)病組與未

3、發(fā)病組及對照組股骨頭中表達(dá)的差異，觀察不同時期、不同分組實驗動物股骨頭骨細(xì)胞凋亡的情況。
　　 結(jié)果：
　　 1.激素注射組48只，根據(jù)日本骨壞死多中心協(xié)會提出的標(biāo)準(zhǔn)化股骨頭非創(chuàng)傷性壞死的診斷標(biāo)準(zhǔn)，7只實驗動物被認(rèn)定為股骨頭缺血性壞死陽性，發(fā)生率22.58％(7/31)。
　　 2.影像學(xué)表現(xiàn)：激素注射組出現(xiàn)股骨頭骨質(zhì)密度均勻增高，骨紋理消失，股骨頭骨骺變小，高度下降，髖關(guān)節(jié)間隙增寬。并隨著用藥時間的延長，上述癥

4、狀逐漸加重。
　　 3.組織病理學(xué)表現(xiàn)：激素注射組出現(xiàn)骨小梁稀疏、變細(xì)，部分?jǐn)嗔?，排列不?guī)則。并隨著用藥時間的延長，上述癥狀逐漸加重，至第8周末，激素注射組骨小梁面積比與對照組比較，統(tǒng)計學(xué)差異較大(P<0.01)；激素注射發(fā)病組出現(xiàn)骨陷窩中骨細(xì)胞核固縮、變形、邊聚，空骨陷窩增多，而激素注射發(fā)病組實驗動物健側(cè)和激素注射未發(fā)病組及對照組雙側(cè)股骨頭僅有少量骨陷窩空缺。至第8周末，激素注射發(fā)病組患側(cè)骨陷窩空缺率與各組比較，統(tǒng)計學(xué)差異較大

5、(P<0.01)；其余各組之間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　 4.超微結(jié)構(gòu)表現(xiàn)：軟骨下骨質(zhì)中骨細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)胞皺縮，細(xì)胞膜不完整，部分細(xì)胞質(zhì)中有脂滴，未見細(xì)胞器；核膜不完整，核膜分離，染色質(zhì)濃縮、邊聚。
　　 5.激素注射發(fā)病組實驗動物患側(cè)股骨頭軟骨均有糖皮質(zhì)激素受體表達(dá)，且表達(dá)量較高，激素注射發(fā)病組實驗動物健側(cè)和激素注射未發(fā)病組及對照組雙側(cè)股骨頭中糖皮質(zhì)激素受體表達(dá)極低或不表達(dá)，激素注射發(fā)病組患側(cè)股骨頭軟骨

6、中糖皮質(zhì)激素受體的表達(dá)與其余各組比較，統(tǒng)計學(xué)差異較大(P<0.01)；其余各組組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　 6.激素注射發(fā)病組患側(cè)股骨頭軟骨細(xì)胞、骨細(xì)胞均有明顯凋亡現(xiàn)象；激素注射發(fā)病組實驗動物健側(cè)和激素注射未發(fā)病組及對照組雙側(cè)股骨頭軟骨細(xì)胞、骨細(xì)胞僅有少量凋亡。激素注射發(fā)病組患側(cè)股骨頭軟骨細(xì)胞、骨細(xì)胞凋亡率與其余各組比較，統(tǒng)計學(xué)差異較大(P<0.01)；其余各組組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。<