秦嶺山區(qū)野生獼猴桃種質(zhì)資源的生物學特性及RAPD分析.pdf

1、我國獼猴桃主要分布在秦嶺以南和橫斷山脈以東的地區(qū)，秦嶺山區(qū)具有豐富的野生種質(zhì)資源，也是獼猴桃的優(yōu)生區(qū)。獼猴桃為多年生、雌雄異株植物，自然界種間雜交現(xiàn)象明顯，特別是不同變種之間的雜交產(chǎn)生出一系列過渡類型，加之染色體倍性復(fù)雜，使得某些種問及變種間的分類界定以及遺傳特性不清。本研究通過對秦嶺北麓野生獼猴桃部分種質(zhì)資源的調(diào)查、評價以及RAPD分析，建立秦嶺野生獼猴桃資源生物學特性、果實營養(yǎng)品質(zhì)以及分子遺傳圖譜數(shù)據(jù)庫，篩選出適合生產(chǎn)以及育種的優(yōu)良

2、獼猴桃種質(zhì)資源或新品種；為獼猴桃的遺傳親緣關(guān)系和獼猴桃種質(zhì)資源的鑒定及新品種的保護提供依據(jù)。主要結(jié)果如下： 1.通過對秦嶺山區(qū)野生獼猴桃資源以及當前生產(chǎn)的主要栽培品種的生物學特性及果實品質(zhì)分析，建立了秦嶺山區(qū)野生獼猴桃資源果實營養(yǎng)品質(zhì)數(shù)據(jù)庫，從中篩選出成熟期僅次于早熟栽培品種武植2號的野生獼猴桃資源99-9株系；通過成熟期的確定分析得出99-8、99-9、99-10、99-13、99-14、99-16和99-17等7個株系可做為

3、早熟育種材料。通過系統(tǒng)聚類得到單果重較海沃德更大的野生獼猴桃資源99-5、99-9、99-11、99-13、99-16、99-20、99-21、99-23和99-24等9個株系；含Vc較武植2號多的獼猴桃99-8、99-13、99-23的3個株系；固酸比較武植2號大的99-9、99-13和99-14的3個株系：綜合優(yōu)良性狀較好的99-9和99-13兩個株系。特別是99-9，無論從品種的早熟性、果實品質(zhì)還是從抗性角度考慮都頗具潛力。因此研

4、究具有突出經(jīng)濟性狀的野生獼猴桃資源將在今后的育種實踐中發(fā)揮巨大的作用。 2.采用3種不同的方法，即經(jīng)典CTAB法、改良CTAB法、氯化芐法提取野生獼猴桃基因組DNA效果均較好，其中改良CTAB法提取的DNA質(zhì)量最高，DNA降解少，雜質(zhì)含量少。通過對退火溫度、循環(huán)次數(shù)、DNA模板用量、DNA聚合酶的種類和濃度等因素的研究，初步建立了野生獼猴桃RAPD分析體系，從PCR擴增程序和反應(yīng)體系兩個方面對野生獼猴桃RAPD分析體系進行了優(yōu)化

5、，并驗證了優(yōu)化后的體系，擴增譜帶清晰、多態(tài)性強，穩(wěn)定性好。 3.利用隨機擴增多態(tài)性DNA標記(RAPD)技術(shù)對采自秦嶺山區(qū)的24個野生獼猴桃優(yōu)良單株和中華等6個種或變種的46份資源進行了遺傳多樣性分析。通過引物篩選，從16個RAPD引物中擴增出235條帶，其中227條為多態(tài)帶，占96.29％。UPGMA聚類分析結(jié)果揭示了各資源間的親緣關(guān)系，23個野生資源屬美味獼猴桃(A deliciosa var．deliciosa)，與海沃德

6、歸為一類；1個野生資源屬中華獼猴桃(A．chinensis Planch)。 4.通過對秦嶺山區(qū)野生獼猴桃資源的生物學特性、果實品質(zhì)和遺傳距離結(jié)合起來分析，將野生98.13號確定為中華系列獼猴桃；其余23份野生獼猴桃資源與啞特、秦美、徐冠、徐香等品種遺傳距離較近，歸為一大類，由此得出這23份野生獼猴桃資源屬于美味獼猴桃。野生99-23、99-24的諸多生物學特性(成熟期等)與啞特很接近，從RAPD聚類分析結(jié)果可看到99-23、9