超聲靶向微泡破壞對(duì)支持細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)研究.pdf

1、目的:探討超聲靶向微泡破壞對(duì)體外培養(yǎng)大鼠支持細(xì)胞的影響。
　　 方法:分離與培養(yǎng)大鼠睪丸支持細(xì)胞,制作細(xì)胞懸液。取細(xì)胞懸液添加0.01ml微泡造影劑后即行超聲輻照,超聲輻照時(shí)間為60 s,輸出聲強(qiáng)為0.5W/cm2,頻率為1MHz。分別取照射后5 min,2、6、12、24 h作為分組時(shí)間點(diǎn),在各時(shí)間點(diǎn)及進(jìn)行支持細(xì)胞波形蛋白免疫組化染色、測(cè)定細(xì)胞超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(Malo

2、ndialdehyde,MDA)以及存活細(xì)胞計(jì)數(shù)。
　　 結(jié)果:成功分離與培養(yǎng)出大鼠睪丸支持細(xì)胞。超聲聯(lián)合微泡作用于支持細(xì)胞后5 min,2、6、12、24 h,支持細(xì)胞內(nèi)波形蛋白的表達(dá)分別為:0.141±0.009、0.149±0.006、0.218±0.007、0.761±0.012、0.847±0.011,與空白對(duì)照及單純超聲組比較波形蛋白表達(dá)量的下降有顯著差異(P<0.05)。而空白對(duì)照組與單純超聲組比較波形蛋白表達(dá)量的

3、下降無顯著差異(P>0.05)。支持細(xì)胞內(nèi)MDA、SOD的含量在5 min時(shí)為9.15±0.17、11.37±0.48,2 h時(shí)為13.25±0.56、12.54±0.36,6 h為14.05±0.28、13.79±0.62,到12 h為9.47±0.12、14.33±0.63,與各自對(duì)照組比較均有顯著差異。24 h時(shí)為3.75±0.48、16.02±0.33與各自對(duì)照組比較均無顯著差異。而空白對(duì)照、單純超聲及超聲+微泡組的支持細(xì)胞在2