高產(chǎn)酒率釀酒酵母單倍體的分離與雜交育種.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文在篩選獲得一批酒精發(fā)酵力較強的二倍體釀酒酵母(Sacchromycescerevisiae)菌株的基礎上,優(yōu)化產(chǎn)孢條件,應用篩選獲得的高產(chǎn)酒精的單倍體菌株,經(jīng)雜交育種構建高產(chǎn)釀酒酵母菌株。 以二倍體菌株ZJD3-3、ZJD3-4、ZJD3-7、ZJD3-9和ZJD3-11(稱為ZJD3系列)及非整倍體菌株C19為實驗菌株,經(jīng)對產(chǎn)孢培養(yǎng)基的優(yōu)選,確認McClary產(chǎn)孢培養(yǎng)基為適宜的高產(chǎn)孢率培養(yǎng)基。在該培養(yǎng)基上經(jīng)25℃、7天培養(yǎng)

2、,釀酒酵母的產(chǎn)孢率可達到47%。對ZJD3系列二倍體菌株進行單倍體分離,獲得單倍體71株。對篩選所得單倍體菌株,以及實驗室原有單倍體菌株c36、c36-8、c36-9進行交配型和發(fā)酵性能測定,交配型為a型的單倍體與交配型為a的單倍體數(shù)目差異較大。得交配型a的單倍體菌株30株,交配型a的單倍體菌株18株。從中篩選獲得發(fā)酵性能較強的單倍體菌株4株,其中l(wèi)株為a型,3株為僅型,發(fā)酵性能最強的ZS-5菌株其同等條件下酒精發(fā)酵后的酒度高出二倍體親

3、株4.5%。 以得到的4株強發(fā)酵菌株和單倍體菌株c36、c36-8、c36-9以及非整倍體菌株C19為雜交親株,分別進行群體雜交,發(fā)現(xiàn)不同交配型單倍體混合2h后開始出現(xiàn)啞鈴型細胞,平板分離培養(yǎng)48h后,經(jīng)鑒定共獲得雜合子124株,經(jīng)酒精發(fā)酵測驗,從中篩選獲得發(fā)酵性能優(yōu)良的酵母菌株6株。結果表明,95%以上的雜合子酒精發(fā)酵性能優(yōu)于雜交親株,最優(yōu)者比雜交單倍體親株提高17.7%,比原始二倍體菌株高15.5%。經(jīng)雜交育種與重復酒精發(fā)酵

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