針刺督脈經(jīng)穴和夾脊穴對脊髓損傷大鼠神經(jīng)干細胞的作用.pdf

1、背景：隨著現(xiàn)代化交通和工業(yè)的發(fā)展,脊髓損傷的發(fā)病率正在逐年增加。脊髓損傷常繼發(fā)于脊柱的暴力外傷,病人以脊髓受傷平面以下肢體的運動障礙為主要表現(xiàn),其病理生理機制以神經(jīng)細胞的凋亡最受關(guān)注。近幾年來,應(yīng)用神經(jīng)干細胞治療脊髓損傷的研究日益成為重點和熱點。已有實驗研究表明,針刺治療能促進脊髓損傷動物內(nèi)源性神經(jīng)干細胞的增殖和分化。臨床上也陸續(xù)有應(yīng)用針刺督脈經(jīng)穴和夾脊穴治療脊髓損傷成功的報導(dǎo)。因此我們設(shè)想針刺督脈經(jīng)穴和夾脊穴是通過原位誘導(dǎo)脊髓內(nèi)源性神

2、經(jīng)干細胞的增殖來修復(fù)脊髓損傷,從而改善或治愈截癱的。
　　目的：本實驗利用改良Allen WD脊髓損傷動物模型模擬臨床上針刺督脈經(jīng)穴和夾脊穴治療脊髓損傷的過程,觀察針刺治療過程中動物模型雙后肢神經(jīng)功能恢復(fù)的情況、脊髓的病理變化以及脊髓內(nèi)源性神經(jīng)干細胞的增殖情況,研究針刺督脈經(jīng)穴和夾脊穴對脊髓損傷大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)、脊髓結(jié)構(gòu)改變和內(nèi)源性神經(jīng)干細胞增殖的影響。進一步分析內(nèi)源性神經(jīng)干細胞的增殖與神經(jīng)功能恢復(fù)之間的聯(lián)系,以及針刺原位誘導(dǎo)脊髓

3、內(nèi)源性神經(jīng)干細胞增殖的機制,為揭示針刺治療脊髓損傷的機理提供新的理論依據(jù)。
　　方法：取SPF級6周齡SD大鼠50只以改良Allen WD法制作第十胸椎水平急性重度脊髓背側(cè)挫傷模型。模型隨機分為:①針刺組24只,②對照組24只,③空白組2只。針刺組和對照組又隨機分為14、30、60和90d四個時間點,每個時間點6只?？瞻捉M制作模型后4小時取材進行HE染色,觀察切片組織損傷的程度。針刺組每天針刺督脈經(jīng)穴和夾脊穴一次,對照組不針刺;兩

4、組分別在術(shù)后1、14、30、60和90d用 Tarlov評分和IP評分評價雙后肢功能;兩組模型在取材前連續(xù)三天腹腔注射BrdU Bid標(biāo)記相應(yīng)時間增殖的內(nèi)源性神經(jīng)干細胞,按不同時間點分別于術(shù)后14、30、60和90d評分后取傷段脊髓進行HE染色和抗BrdU免疫組化染色,觀察兩組動物在不同時間點脊髓形態(tài)學(xué)特點,觀察各切片BrdU陽性細胞數(shù)目及分布情況;進行統(tǒng)計分析比較兩組之間不同時間點BrdU陽性細胞數(shù)目的差異。
　　結(jié)果：空白組H

5、E染色見脊髓內(nèi)部結(jié)構(gòu)輕度破壞,以脊髓背側(cè)為主,散在小出血灶和小片狀壞死灶,白質(zhì)神經(jīng)纖維水腫。功能評分顯示在各時間點針刺組雙下肢功能改善與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),功能改善與治療時間延長平行。對照組脊髓病理性重構(gòu)、神經(jīng)元凋亡日趨加重;針刺組脊髓結(jié)構(gòu)逐漸恢復(fù)正常,正常神經(jīng)元的數(shù)目逐漸增多。免疫組化染色顯示不同時間點針刺組和對照組之間 BrdU陽性細胞數(shù)差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。
　　結(jié)論：針刺督脈經(jīng)穴和夾