海綿中產(chǎn)生物表面活性劑微生物的篩選及其性質(zhì)研究.pdf

1、海綿是一大類低等多細(xì)胞動物,其體內(nèi)及體表富集了大量的、不同種類的微生物。本論文以篩選生物表面活性劑生產(chǎn)菌為目的,從海綿中篩選產(chǎn)生物表面活性劑的微生物,并對其進(jìn)行菌種鑒定,然后對其中表面活性和乳化活性均較好的菌株進(jìn)行發(fā)酵條件的優(yōu)化,對產(chǎn)生的生物表面活性劑的性質(zhì)進(jìn)行了初步研究,這為該生物表面活性劑應(yīng)用于實(shí)際提供了理論基礎(chǔ)。
　　 本論文從繁茂膜海綿和南海海綿的研磨漿液中,經(jīng)富集培養(yǎng)、血平板篩選和排油活性測定,初步分離了38株產(chǎn)生物表

2、面活性劑的微生物,再利用表面張力法從初篩菌中篩選出2株產(chǎn)生物表面活性劑的優(yōu)良菌株,編號分別為H10和S6X,其產(chǎn)生的生物表面活性劑均可以把培養(yǎng)基的表面張力降到30.0mN/m以下。
　　 對篩選出的菌株H10和菌株S6X進(jìn)行了系統(tǒng)分類鑒定,通過16S rDNA同源序列比對和系統(tǒng)發(fā)育樹分析結(jié)合形態(tài)觀察和生理生化實(shí)驗(yàn),鑒定菌株H10為芽孢桿菌屬的短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus),菌株S6X為假單胞菌屬的帕氏假單胞菌(

3、Pseudomonaspalleronii)。
　　 采用分光光度法測定菌株的生長曲線,并對兩株細(xì)菌發(fā)酵液的乳化活性進(jìn)行了測定,其中帕氏假單胞菌S6X產(chǎn)生的生物表面活性劑具有良好的乳化性能,能使乳化液保持80％以上的穩(wěn)定性達(dá)14天以上。
　　 通過單因素實(shí)驗(yàn)研究了接種量、溫度、初始pH和溶氧量等因素對菌株S6X生長及生物表面活性劑產(chǎn)量的影響。確定該菌株種子液的最佳搖瓶條件為:發(fā)酵溫度30℃,初始pH7.0,500mL三角

4、瓶裝液量100mL,搖床轉(zhuǎn)速180r/min:產(chǎn)生物表面活性劑的最佳搖瓶發(fā)酵條件為:轉(zhuǎn)接種齡32h,接種量3％,發(fā)酵溫度30℃,初始pH7.0,500mL三角瓶裝液量150mL,搖床轉(zhuǎn)速180r/min。經(jīng)優(yōu)化后菌株S6X發(fā)酵液的排油圈直徑由原來的9.0cm提高至12.0cm以上,達(dá)到了較好的優(yōu)化效果。
　　 本論文對菌株S6X產(chǎn)生的生物表面活性劑進(jìn)行了提取和初步純化,并利用TLC法對該菌株產(chǎn)生的生物表面活性劑進(jìn)行了定性分析,同