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文檔簡(jiǎn)介
1、菌根是菌根真菌與植物根部形成的共生體。通常在生態(tài)系統(tǒng)中對(duì)叢枝菌根(AM)真菌的鑒定是建立在對(duì)其無(wú)性孢子的形態(tài)特征的了解這一基礎(chǔ)之上的,而對(duì)于侵入植物根系內(nèi)的真菌結(jié)構(gòu),雖然能通過(guò)特定的染色方法觀察到它的存在,卻很難據(jù)此區(qū)分出不同種的AM真菌,必需借助于分子生物學(xué)技術(shù)才能準(zhǔn)確鑒定。本研究通過(guò)使用真核生物通用引物L(fēng)R1-NDL22,對(duì)AM真菌Glomusclaroideum和Scutellosporacastanea孢子的25SrDNA部分序
2、列進(jìn)行PCR擴(kuò)增,將測(cè)序的結(jié)果與通過(guò)blastn檢索得到大量同源序列進(jìn)行比對(duì),找出特異性位點(diǎn),以此為基礎(chǔ)設(shè)計(jì)出種特異性引物Gc2和Sc2。經(jīng)嵌套PCR驗(yàn)證,這兩對(duì)引物特異性良好,可作為分子探針使用。 自然界中,AM真菌存在于多種類型的土壤中,包括鹽漬化土壤。然而不同種的AM真菌對(duì)鹽的耐受能力是存在差異的。本論文以三種AM真菌Glomusmosseae,Glomusclaroideum和Glomusintraradices為對(duì)象,
3、研究了鹽脅迫下3種菌分別單接種和混合接種對(duì)宿主植物紫云英生長(zhǎng)的影響及它們?cè)诨旌辖臃N根段中的行為和相互作用。第7周收獲后檢測(cè)了植物地上和地下部分干重,對(duì)植物根段進(jìn)行曲利苯藍(lán)(Trypanblue)染色計(jì)算了宿主根系菌根侵染強(qiáng)度(M%),同時(shí)通過(guò)對(duì)根段進(jìn)行組織染色檢測(cè)了不同鹽濃度下代表AM真菌活力的琥珀酸脫氫酶活性(SDH%)和代表AM真菌有效性的堿性磷酸酶活性(ALP%)。結(jié)果表明接種菌根真菌能顯著提高植物對(duì)鹽脅迫的耐受能力,同時(shí)隨著鹽濃
4、度的增加,菌根真菌的侵染能力呈下降趨勢(shì),但不同菌根真菌受鹽濃度影響的程度不一,鹽濃度對(duì)Gmosseae單接種的處理抑制作用最強(qiáng),對(duì)G.claroideum次之,而對(duì)G.intraradices和混合接種處理的抑制作用并不明顯。為了研究混合侵染根段中3種AM真菌間的相互作用,各個(gè)鹽濃度下在混合接種處理中隨機(jī)挑選15條侵染程度較高的TB染色根段,利用相應(yīng)種的特異性引物(B15,Gc2,gi1)作為探針進(jìn)行嵌套PCR,結(jié)果表明不管在何種鹽濃度
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