鹽脅迫下三種菌根真菌對紫云英生長的影響及其相互作用.pdf

1、菌根是菌根真菌與植物根部形成的共生體。通常在生態(tài)系統(tǒng)中對叢枝菌根(AM)真菌的鑒定是建立在對其無性孢子的形態(tài)特征的了解這一基礎(chǔ)之上的，而對于侵入植物根系內(nèi)的真菌結(jié)構(gòu)，雖然能通過特定的染色方法觀察到它的存在，卻很難據(jù)此區(qū)分出不同種的AM真菌，必需借助于分子生物學(xué)技術(shù)才能準(zhǔn)確鑒定。本研究通過使用真核生物通用引物L(fēng)R1-NDL22，對AM真菌Glomusclaroideum和Scutellosporacastanea孢子的25SrDNA部分序

2、列進行PCR擴增，將測序的結(jié)果與通過blastn檢索得到大量同源序列進行比對，找出特異性位點，以此為基礎(chǔ)設(shè)計出種特異性引物Gc2和Sc2。經(jīng)嵌套PCR驗證，這兩對引物特異性良好，可作為分子探針使用。 自然界中，AM真菌存在于多種類型的土壤中，包括鹽漬化土壤。然而不同種的AM真菌對鹽的耐受能力是存在差異的。本論文以三種AM真菌Glomusmosseae，Glomusclaroideum和Glomusintraradices為對象，

3、研究了鹽脅迫下3種菌分別單接種和混合接種對宿主植物紫云英生長的影響及它們在混合接種根段中的行為和相互作用。第7周收獲后檢測了植物地上和地下部分干重，對植物根段進行曲利苯藍(Trypanblue)染色計算了宿主根系菌根侵染強度(M％)，同時通過對根段進行組織染色檢測了不同鹽濃度下代表AM真菌活力的琥珀酸脫氫酶活性(SDH％)和代表AM真菌有效性的堿性磷酸酶活性(ALP％)。結(jié)果表明接種菌根真菌能顯著提高植物對鹽脅迫的耐受能力，同時隨著鹽濃

4、度的增加，菌根真菌的侵染能力呈下降趨勢，但不同菌根真菌受鹽濃度影響的程度不一，鹽濃度對Gmosseae單接種的處理抑制作用最強，對G.claroideum次之，而對G.intraradices和混合接種處理的抑制作用并不明顯。為了研究混合侵染根段中3種AM真菌間的相互作用，各個鹽濃度下在混合接種處理中隨機挑選15條侵染程度較高的TB染色根段，利用相應(yīng)種的特異性引物(B15，Gc2，gi1)作為探針進行嵌套PCR，結(jié)果表明不管在何種鹽濃度