一種快速生長(zhǎng)的新型甘藍(lán)型油菜的合成及其小孢子培養(yǎng)的研究.pdf

1、甘藍(lán)型油菜(Brassica napus L.)是世界上栽培面積最大的油菜類型，具有適應(yīng)性廣，產(chǎn)量高，抗病、抗逆性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。但甘藍(lán)型油菜的遺傳背景比蕓薹屬其他物種狹窄，遺傳基礎(chǔ)單一的問(wèn)題十分突出。目前很多學(xué)者將同科的模式植物——擬南芥中的研究結(jié)果用于油菜的基因組學(xué)的分析和研究，但將擬南芥數(shù)據(jù)用于油菜的遺傳改良是比較困難的。因?yàn)橛筒耸钱愒此谋扼w，基因組比擬南芥基因組大，同時(shí)擬南芥的種子成分和油菜相比差異較大。 本研究用快速生長(zhǎng)的白

2、菜型油菜(B．rapa，AA)和快速生長(zhǎng)的甘藍(lán)(B．oleracea,CC)通過(guò)原生質(zhì)體融合的方法合成了一個(gè)快速生長(zhǎng)的新型甘藍(lán)型油菜(B．napus L.，AACC)，該材料在15-20℃生長(zhǎng)條件下，從種植到成熟只需8周時(shí)間，而且個(gè)體小，有利于大規(guī)模的繁殖。但該材料是自交不親和，為了獲得純合的實(shí)驗(yàn)材料，我們采用花粉培養(yǎng)的方法獲得該材料的純合(DH)系，生產(chǎn)出大量的種子；以便將這些材料用于T-DNA插入突變體的構(gòu)建和油菜功能基因組學(xué)的研究

3、。 該研究通過(guò)體細(xì)胞融合方法獲得白菜型油菜和甘藍(lán)體細(xì)胞雜種，通過(guò)細(xì)胞學(xué)觀察分析雜種的染色體組成，并對(duì)融合植株的小孢子進(jìn)行培養(yǎng)，構(gòu)建DH系，獲得如下主要結(jié)果： (1)對(duì)油菜原生質(zhì)體再生及融合條件的影響因素進(jìn)行了研究，在本實(shí)驗(yàn)室成功建立油菜及其近緣屬種的原生質(zhì)體融合體系。結(jié)果表明，外植體的生理狀態(tài)、培養(yǎng)基的成分、激素配比、原生質(zhì)體的密度(包括培養(yǎng)密度和融合親本原生質(zhì)體的密度)等因素對(duì)原生質(zhì)體持續(xù)分裂和植株的再生具有較大的影響

4、。 (2)選用生長(zhǎng)周期短的親本作為融合材料，通過(guò)原生質(zhì)體融合方法人工合成甘藍(lán)型油菜。該材料整個(gè)生長(zhǎng)周期只需8周，比普通甘藍(lán)型油菜的生長(zhǎng)周期大大縮短。而且個(gè)體小(70-80cm)，有利于大規(guī)模的繁殖和T-DNA插入突變體的構(gòu)建，便于油菜功能基因組學(xué)研究的開(kāi)展。獲得的雜種植株為雙親染色體之和(2n=38)，育性較高(>95％)。 (3)對(duì)新合成的甘藍(lán)型油菜進(jìn)行小孢子培養(yǎng)，成功建立了適合于油菜小孢子培養(yǎng)和繁殖的技術(shù)體系(高溫預(yù)