甘藍(lán)型油菜不同CMS的遺傳標(biāo)記及RT-PCR研究.pdf

1、油菜是一種重要的油料作物。油菜雜種優(yōu)勢(shì)利用，超高產(chǎn)及強(qiáng)優(yōu)勢(shì)組合篩選越益引起了各國(guó)政府和育種家的重視。目前我國(guó)主要利用細(xì)胞質(zhì)雄性不育系生產(chǎn)雜交油菜品種。因此，選育新型細(xì)胞質(zhì)類(lèi)型的甘藍(lán)型油菜雄性不育系，對(duì)于我國(guó)雜交油菜生產(chǎn)發(fā)展具有重要意義。本研究在花器形態(tài)、酯酶同工酶、EST-SSR．標(biāo)記和RAPD標(biāo)記分析及CMS相關(guān)基因RNA表達(dá)方面對(duì)國(guó)內(nèi)重要的甘藍(lán)型油菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育類(lèi)型Xin1系統(tǒng)、Ogu系統(tǒng)、Pol系統(tǒng)和Shan 2A系統(tǒng)、保持系、

2、恢復(fù)系以及國(guó)內(nèi)主要的常規(guī)品種進(jìn)行比較分析，為高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)雜交油菜的選育提供重要的參考依據(jù)。其主要研究結(jié)果如下： 1.觀察開(kāi)花期的花器形態(tài)，比較不同不育系及保持系的雌蕊授粉情況，對(duì)選育雜交油菜具有重要意義。Xin1、Ogu和Shan2A CMS的雄蕊明顯短于柱頭長(zhǎng)，花絲不伸長(zhǎng)或略有伸長(zhǎng)，花藥萎縮，花粉微量，表現(xiàn)出明顯不育性。Pol CMS在花器形態(tài)上與保持系B355沒(méi)有顯著性差異，但花粉囊呈中空干癟，有少量花粉，花粉量遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于B35

3、5。此外Xin1 CMS花瓣明顯皺縮，六個(gè)雄蕊不完整或心皮化現(xiàn)象，花粉囊中空干癟，表現(xiàn)為花器形態(tài)上比較理想的不育材料?；ㄝ鄬捠俏ㄒ灰粋€(gè)各材料間不存在差異的性狀。 2.采用聚丙烯酰胺凝膠垂直板電泳法，對(duì)甘藍(lán)型油菜的4個(gè)細(xì)胞質(zhì)雄性不育系及其保持系的嫩葉片進(jìn)行了酯酶同工酶分析，結(jié)果表明：6個(gè)共同酶帶，3個(gè)差異酶帶。其中除Xinl CMS只有一條遷移率為0.77的較強(qiáng)，其他4個(gè)材料均具有一條遷移率為0.74的酶帶。此外，Pol和Shan

4、2A還有遷移率為0.77的強(qiáng)譜帶和遷移率為0.86的一條較弱譜帶。而Ogu CMS和B355都只有遷移率為0.74的特異性譜帶。不同不育系及保持系之間酯酶同工酶在酶帶數(shù)量和活性上都存在差異。 3.采用EST-SSR和RAPD兩種分子標(biāo)記技術(shù)，檢測(cè)甘藍(lán)型油菜4份不育系、3份保持系、10份恢復(fù)系和11份常規(guī)品種共35個(gè)材料的遺傳多樣性及與雜種優(yōu)勢(shì)的關(guān)系。結(jié)果共檢測(cè)到399個(gè)等位位點(diǎn)，其中130個(gè)等位變異，占總檢測(cè)位點(diǎn)的32.57％。

5、NTSYS軟件聚類(lèi)分析結(jié)果表明：35份材料遺傳距離范圍為0.0280-0.2801，在遺傳距離(GD)0.1401下分為6類(lèi)，Ogu、Polima和Shan 2A CMS聚在第V類(lèi)，與Xin1 CMS遺傳距離較遠(yuǎn)；不育系間的遺傳差異比不育系與保持系、恢復(fù)系及常規(guī)品種之間小，基本反映了品種(系)的遺傳基礎(chǔ)和系譜來(lái)源。 4.根據(jù)油菜CMS的相關(guān)基因orf224、orf222、orf138設(shè)計(jì)6對(duì)特異引物，對(duì)Pol、Shan2A、Og