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文檔簡介
1、目的:
觀察硫氫化鈉(NaHS)對(duì)骨癌性疼痛(bone cancer pain,BCP)模型大鼠熱痛行為、脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞活化及細(xì)胞因子IL-6、TNF-α基因表達(dá)的影響,并探討其可能機(jī)制。
方法:
清潔級(jí)雌性SD大鼠90只,150~180g,采用隨機(jī)數(shù)字表法分為6組,每組15只:對(duì)照組、假手術(shù)組、BCP組、NaHS低組、NaHS中組、NaHS高組,對(duì)照組不做任何手術(shù)處理,假手術(shù)組在大鼠脛骨髓腔注入10ul生
2、理鹽水,而BCP組在脛骨髓腔注入等量的Walker256腹水癌細(xì)胞,NaHS低、NaHS中、NaHS高組在 BCP模型的基礎(chǔ)上,經(jīng)大鼠腹腔注射相同劑量不同濃度的NaHS。測定各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)熱刺激縮足潛伏期(paw withdrawal thermal latency,PWTL)、免疫組化法檢測大鼠脊髓背角OX-42(小膠質(zhì)細(xì)胞活化的標(biāo)志性蛋白)的表達(dá)、RT-PCR檢測大鼠脊髓背角IL-6和TNF-a基因表達(dá),組間和組內(nèi)采用單因素方差
3、分析的統(tǒng)計(jì)方法,多重比較,P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:
(1)痛行為學(xué)變化:術(shù)前各組間大鼠雙側(cè)后肢PWTL的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);與CT組比較,術(shù)后Sham組大鼠的PWTL無顯著差異(P>0.05);與Sham組相比,BCP組大鼠術(shù)后第1d、3d、5d、7d、10d、14d、18d、21d術(shù)側(cè)后肢PWTL降低,其中術(shù)后第14天降低顯著(29.77±0.31s vs11.3±0.87s,P<0.01)
4、;NaHS可抑制BCP組大鼠PWTL的降低,NaHS中組的PWTL顯著高于BCP組(17.16±0.64s vs11.3±0.87s,P<0.01);
(2)免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示,與CT組比,Sham組大鼠的脊髓背角小膠質(zhì)OX-42表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);與Sham組相比,BCP組大鼠脊髓背角OX-42的表達(dá)呈時(shí)間依賴性增加,術(shù)后第14天OX-42表達(dá)顯著增高(187.44±2.82 vs66.89±0.23,P
5、<0.01);NaHS能抑制BCP大鼠脊髓背角OX-42表達(dá),與BCP組相比,NaHS中組OX-42的表達(dá)水平顯著降低(110.17±2.86 vs187.44±2.82,P<0.01);
(3)RT-PCR檢測結(jié)果顯示,與CT組比,Sham組大鼠脊髓背角IL-6、TNF-αmRNA表達(dá)水平無顯著差異(P>0.05);與Sham組比,BCP組大鼠脊髓背角IL-6、TNF-αmRNA表達(dá)水平均顯著增高(IL-6:0.869±0.
6、025 vs0.029±0.002,P<0.01;TNF-α:1.539±0.145 vs0.087±0.008,P<0.01);NaHS呈劑量依賴性降低BCP大鼠脊髓背角IL-6、TNF-αmRNA表達(dá),其中NaHS中組IL-6、TNF-αmRNA表達(dá)水平降低明顯(IL-6:0.252±0.021 vs0.869±0.025,P<0.01;TNF-α:0.29±0.086 vs1.539±0.145,P<0.01)。
結(jié)論:
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