取食不同柑桔種質(zhì)資源的桔全爪螨對藥劑的敏感性及種群遺傳分化研究.pdf

1、桔全爪螨Panonychus citri McGregor，屬蛛形綱，蜱螨目，葉螨科，全爪螨屬，是一種嚴(yán)重危害柑桔的世界性害螨。由于對桔全爪螨的防治長期依賴于化學(xué)農(nóng)藥，用藥頻繁而不合理，加之該螨體小、世代多、繁殖速度快、發(fā)育歷期短等特點，抗性發(fā)展極為迅速，嚴(yán)重威脅著生產(chǎn)中化學(xué)防治的有效性。此外由于體小、無翅，其遷移能力非常有限，僅能靠爬行進(jìn)行短距離移動或吐絲借氣流在空中進(jìn)行較長距離的移動，從而導(dǎo)致不同種群間遺傳分化的存在。 本研

2、究綜合運(yùn)用了生物測定、同工酶技術(shù)和微衛(wèi)星技術(shù)，探討桔全爪螨不同種群對噠螨靈和阿維菌素兩種藥劑的敏感性、取食不同種質(zhì)資源桔全爪螨種群的遺傳分化，探討藥劑敏感性與酯酶同工酶的相關(guān)性，尋求桔全爪螨種群抗藥性的生化監(jiān)測指標(biāo)，從而為桔全爪螨種群的可持續(xù)控制提供理論依據(jù)。 生物測定結(jié)果表明，取食不同柑桔種質(zhì)資源的桔全爪螨種群對噠螨靈和阿維菌素的敏感性存在一定的差異。對噠螨靈的相對敏感性由強(qiáng)到弱依次為太田椏柑種群、大浦種群、枳橙種群、尤力克檸

3、檬種群和紐荷爾種群；對阿維菌素的相對敏感性由強(qiáng)到弱依次為大浦種群、枳橙種群、尤力克檸檬種群、太田椪柑種群和紐荷爾種群。其中取食紐荷爾的桔全爪螨種群對噠螨靈和阿維菌素均最不敏感，其LC50分別是太田槿柑種群和大浦種群LC50的2.43和3.86倍。 酯酶同工酶電泳結(jié)果表明，桔全爪螨的酯酶可分為兩組，分別是a-Est和β-Est，其中a-Est多態(tài)性強(qiáng)而適于進(jìn)行種群遺傳結(jié)構(gòu)分析。取食不同柑桔種質(zhì)資源的桔全爪螨種群的酯酶同工酶電泳酶譜

4、存在差異性，不同種群在a-Est位點的基因型頻率和等位基因頻率有所差異。取食尤力克檸檬的桔全爪螨種群a-Est基因型AB頻率最高，為0.57，而取食大浦的種群最低，為0.27。相反取食大浦的種群a-Est基因型AA頻率最高，為0.73，取食紐荷爾的種群最低，為0.10。另外，本研究中取食大浦的種群未檢測到基因型BB。桔全爪螨a-Est等位基因A的頻率在取食大浦的種群中最高，為0.86，而等位基因B的頻率在取食紐荷爾的種群中最高，為0.6

5、5。統(tǒng)計分析結(jié)果表明，取食不同柑桔種質(zhì)資源的桔全爪螨種群對阿維菌素的敏感性與其等位基因B的頻率之間存在顯著的相關(guān)性。由此推知，酯酶在桔全爪螨對阿維菌素的解毒代謝方面起著重要作用，a-Est的等位基因B頻率的增高可能是桔全爪螨對阿維菌素不敏感性增強(qiáng)的原岡之一，這也意味著a-Est的基岡型或基因頻率有可能作為監(jiān)測田間不同種群對阿維菌素敏感性的重要指標(biāo)之一。利用三條微衛(wèi)星引物分別對桔全爪螨五個種群的基因組進(jìn)行擴(kuò)增。結(jié)果表明，每條引物均能擴(kuò)增出

6、數(shù)量不同的條帶，同一引物在不同種群中擴(kuò)增出的條帶也不相同。三條引物產(chǎn)生的條帶從4條(引物S1)到10條(引物33.1 core sequence)，擴(kuò)增條帶多態(tài)性均較高，適合于進(jìn)行多態(tài)性分析。以33.15核心序列為引物，在所有種群中共擴(kuò)增出大小在120-1500 bp之間的10個片段；以N1序列為引物，在所有種群中共擴(kuò)增出大小在100-1500 bp之間的8個片段；以S1序列為引物，在所有種群中共擴(kuò)增出大小在100-530 bp之間的4

7、個片段。 通過a-酯酶等位基因頻率分析對不同柑桔種質(zhì)資源上桔全爪螨各種群的聚類結(jié)果表明，太田椪柑和尤力克檸檬兩種群首先聚在一起，然后依次與枳橙、紐荷爾種群聚在一起，最后與大浦種群聚在一起。通過三個微衛(wèi)星引物(33.15核心序列、S1和N1)分析對不同柑桔種質(zhì)資源上桔全爪螨各種群的聚類結(jié)果表明，太田椏柑和紐荷爾兩種群首先聚在一起，然后與尤力克檸檬種群、枳橙種群依次聚在一起，最后與大浦種群聚在一起。兩種途徑建立的聚類圖均表明，太田椪