抗肌肉特異性激酶單克隆抗體對大鼠重癥肌無力的誘導.pdf

1、目的：通過建立 Lewis大鼠實驗性自身免疫性重癥肌無力(myasthenia gravis，MG)模型(experimental autoimmune MG，EAMG)，以此研究肌肉特異性激酶（muscle-specific kinase，MuSK）抗體(muscle-specific kinase antibody，MuSKAb)和MG發(fā)病機制的關系。
　　方法：選取10只雌性Lewis大鼠，隨機分為實驗組和對照組。采用被動免

2、疫的方法，將MuSK單克隆抗體通過腹腔注射的方式給予實驗組大鼠，對照組大鼠采用同樣的方法給藥，每2小時觀察1次大鼠的飲食飲水情況以及有無臨床癥狀出現(xiàn)，并隨時記錄大鼠的體重變化。給藥96小時后，迅速處死兩組大鼠，并取下大鼠的肋間肌、腓腸肌和脛前肌，與-80℃冰箱中保存。之后對于取下的肌肉組織進行免疫熒光實驗，用以觀察抗MuSK單克隆抗體和MuSK蛋白結合情況和C3補體激活情況。同時做透射電鏡實驗，用以觀察神經肌肉接頭處（NMJ）的形態(tài)學變

3、化。
　　結果：在給藥96小時后實驗組與對照組相比，未出現(xiàn)抓握和嘶叫無力的明顯臨床癥狀。經過免疫熒光實驗后發(fā)現(xiàn)，實驗組肋間肌、腓腸肌和脛前肌的細胞膜表面出現(xiàn)明顯的黃綠色熒光和紅色熒光物質，黃綠色熒光說明MuSK單克隆抗體和跨膜蛋白MuSK發(fā)生特異性結合，紅色熒光說明C3補體抗體和C3發(fā)生特異性結合。而對照組無熒光出現(xiàn)。透射電鏡觀察顯示實驗組大鼠運動終板突觸后區(qū)域簡單化，突觸后膜皺褶退化，分級減少并短縮，突觸間隙略增寬。而實驗組無明