桃蛀螟雄娥對雌娥體表烯烴的感受機(jī)制研究.pdf

1、桃蛀螟（Conegethes punctiferalis），屬鱗翅目草螟科(Lepidoptera: Crambidae)。其分布在東亞、南亞、澳大利亞等地區(qū)，而在我國多個(gè)地區(qū)也有分布，以幼蟲鉆蛀為害多種作物。目前桃蛀螟的防治方法包括農(nóng)業(yè)防治、生物防治和化學(xué)防治等，其中化學(xué)防治是主要的防治方法，但該方法有諸多不足，如農(nóng)藥殘留，農(nóng)藥抗性以及傷害天敵等。近年來，基于昆蟲信息素具有綠色環(huán)保的特點(diǎn)，其已廣泛用于害蟲的預(yù)測預(yù)報(bào)與防治實(shí)踐。桃蛀螟性

2、信息素主要成分是反-10-十六碳烯醛和順-10-十六碳烯醛的混合物（以下簡稱烯醛），但研究表明以該合成品為誘芯的誘捕器對雄蛾的引誘效果偏低。近年來有研究發(fā)現(xiàn)桃蛀螟雌蛾體表的兩種烯烴:順-9-二十七烯（以下簡稱二十七烯）和順，順，順-3，6，9-二十三碳三烯（以下簡稱二十三碳三烯）與烯醛混合后，能夠顯著增強(qiáng)雄蛾在風(fēng)洞中的行為反應(yīng)（近距離滯空飛行和敲打信息素源），然而，雄蛾對這兩種信息素烯烴的感受機(jī)制并不明確，影響其性誘劑技術(shù)的完善。為了明

3、確桃蛀螟雄蛾對信息素烯烴的感受機(jī)制，本研究開展了觸角電生理試驗(yàn)(EAG)、氣相色譜觸角電位儀連用(GC-EAD)檢測試驗(yàn)、風(fēng)洞行為試驗(yàn)，并對雄蛾觸角進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組測序。以下為本研究獲得的主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
　　1.在EAG試驗(yàn)中，用不同濃度的烯醛對雄蛾左右觸角進(jìn)行測試，結(jié)果表明左右觸角對結(jié)果影響并無顯著性差異，為在后續(xù)試驗(yàn)中隨機(jī)選擇觸角提供依據(jù)。在4種梯度濃度下（0.01;0.1;1.0和10頭當(dāng)量濃度），雄蛾觸角分別對兩種烯烴的EAG

4、反應(yīng)相對值之間，以及與正己烷之間均無差異，且均顯著低于烯醛。將兩種烯烴與烯醛混合后，其EAG反應(yīng)相對值則與烯醛之間無顯著性差異。
　　2.GC-EAD實(shí)驗(yàn)中，單獨(dú)測試時(shí)，雄蛾觸角對二十三碳三烯和二十七烯均無觸角電生理信號。將烯醛烯烴混合后進(jìn)行測試時(shí)，也只測到了對烯醛的EAD反應(yīng)。
　　3.風(fēng)洞行為試驗(yàn)方面，設(shè)置鐵絲網(wǎng)阻隔，避免雄蛾直接接觸濾紙（性信息素源）后發(fā)現(xiàn)，在行為指標(biāo)—滯空飛行時(shí)間上，烯醛烯烴混合物的效果與性信息素粗提

5、物相當(dāng)，并且顯著高于烯醛。進(jìn)一步的選擇性試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在無阻隔的情況下，將烯醛與烯烴分別點(diǎn)滴在兩張濾紙上，并將濾紙分別懸掛在風(fēng)洞中不同的空間位置（風(fēng)洞軸向10 cm間隔和徑向2cm間隔）時(shí)，雄蛾僅對烯醛有反應(yīng)，對烯烴沒有反應(yīng)，而且對烯醛的反應(yīng)強(qiáng)度與烯醛單獨(dú)測試時(shí)相當(dāng)。
　　4.最后通過轉(zhuǎn)錄組技術(shù)進(jìn)行了雄蛾觸角轉(zhuǎn)錄組測序，尋找與觸角嗅覺相關(guān)的氣味結(jié)合蛋白(OBP)、普通氣味結(jié)合蛋白(GOBP)、信息素結(jié)合蛋白(PBP)，并與家蠶、棉鈴蟲

6、的相關(guān)序列進(jìn)行進(jìn)化樹比對。通過轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析，桃蛀螟雄蛾觸角中鑒定出28個(gè)OBP基因，其中包括5個(gè)GOBP基因和5個(gè)PBP基因。
　　綜合EAG和風(fēng)洞試驗(yàn)結(jié)果，桃蛀螟雄蛾能夠在近距離通過嗅覺感受雌蛾體表的信息素烯烴，但是相對于烯醛的嗅覺反應(yīng)而言，對烯烴的嗅覺反應(yīng)相對微弱，不易通過觸角電生理方法進(jìn)行檢測，其反應(yīng)值可能低于觸角電位儀的檢測限。同時(shí)，從行為反應(yīng)來看，只有當(dāng)烯烴和烯醛同時(shí)從同一氣味點(diǎn)釋放時(shí)，雄蛾才會表現(xiàn)出對烯烴的行為反應(yīng)。