“勞倦過(guò)度、房事不節(jié)”腎陽(yáng)虛模型下丘腦—垂體—腎上腺皮質(zhì)—胸腺軸的改變及分子免疫機(jī)制的研究.pdf

1、目的:探討“勞倦過(guò)度、房事不節(jié)”誘發(fā)的腎陽(yáng)虛模型小鼠細(xì)胞和分子免疫調(diào)節(jié)作用機(jī)制,同時(shí),進(jìn)一步研究該模型對(duì)下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)-胸腺軸的影響作用機(jī)理。
　　方法:以已經(jīng)建立的“勞倦過(guò)度、房事不節(jié)”腎陽(yáng)虛小鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,將小鼠隨機(jī)分為三組:正常對(duì)照組、勞倦過(guò)度、房事不節(jié)組(模型組)和金匱腎氣丸治療組。對(duì)各組小鼠胸腺組織的形態(tài)學(xué)進(jìn)行光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡觀察,并測(cè)定小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率以及γ-干擾素(IFN-γ)和白細(xì)胞介素-2(IL

2、-2)和白細(xì)胞介素-4(IL-4)等Th1/Th2類細(xì)胞因子含量;采用原位逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR),對(duì)IFN-γ和IL-4的mRNA轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行檢測(cè)分析;利用流式細(xì)胞術(shù)(FACS)對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞的細(xì)胞周期和凋亡進(jìn)行分析。同時(shí)用放射免疫方法測(cè)定腎上腺軸激素含量;利用基因芯片技術(shù)篩選出腦基因表達(dá)譜中與免疫相關(guān)的上、下調(diào)基因。
　　結(jié)果:“勞倦過(guò)度、房事不節(jié)”誘發(fā)的腎陽(yáng)虛模型導(dǎo)致小鼠胸腺組織形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,脾細(xì)胞淋巴細(xì)

3、胞轉(zhuǎn)化率下降,Th1類細(xì)胞因子IL-2和IFN-γ,水平也顯著下降,而Th2類細(xì)胞因子IL-4活性明顯上升，細(xì)胞凋亡率升高,下丘腦-垂體-腎上腺軸激素水平降低。同時(shí),從485個(gè)腦基因中篩選到36個(gè)具有顯著性的與免疫相關(guān)腦差異表達(dá)上、下調(diào)基因,并作了進(jìn)一步分析。而金匱腎氣丸對(duì)上述這些異?？砂l(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。
　　結(jié)論:“勞倦過(guò)度、房事不節(jié)”腎陽(yáng)虛模型小鼠胸腺組織形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)被破壞,并通過(guò)免疫相關(guān)基因的改變而引起Th1類和Th2類細(xì)