聚羥基丁酸與羥基辛酸在軟骨組織工程中的初步研究.pdf

1、組織工程是應用生命科學與工程學的原理與技術，通過構建人體各種組織或器官損傷后的功能和形態(tài)的生物替代物來修復受損組織的一門新興學科。各種原因引起的關節(jié)軟骨損傷在骨科臨床上占據(jù)了很大比例，由于關節(jié)軟骨缺乏血管、神經(jīng)及淋巴組織，自我修復能力有限。為此，其損傷的修復日益迫切。軟骨組織工程作為組織工程中活躍的分支其研究為軟骨修復提供了新的手段，因此，研究開發(fā)軟骨組織工程支架的材料和制備方法對今后軟骨組織缺損修復具有重要的意義。
　　當前軟骨

2、組織工程中研究的重點依然集中在種子細胞的培養(yǎng)、擴增和支架的制備等方面。本文主要進行了種子細胞的培養(yǎng)擴增，PHBHOx/ACTM復合支架的制備，軟骨組織工程支架的表面修飾及支架與細胞的復合培養(yǎng)試驗。
　　本文用骨髓穿刺法直接從乳兔骨髓中取得細胞，通過密度梯度離心法分離到間充質(zhì)干細胞(BMSCs)，并利用貼壁法靜置培養(yǎng)原代BMSCs。72h該細胞的貼壁率達到60％，144h細胞鋪滿瓶底，達到最大的生長數(shù)量，并成功進行了成骨誘導和軟骨誘

3、導。
　　采用溶劑澆鑄-顆粒瀝濾法將具有良好生物相容性和生物可降解性的聚羥基丁酸與羥基辛酸(PHBHOx)為主體材料復合自行制備的脫細胞軟骨基質(zhì)(ACTM)成功制備出孔隙率85％左右，孔徑150-400μm的PHBHOx/ACTM軟骨組織工程復合支架，掃描電鏡觀察表明，ACTM微粒分布均勻，內(nèi)部孔隙相互連通，基本符合軟骨組織工程支架的要求。
　　采用物理吸附法將濃度不同的多聚賴氨酸(PLL)引入支架的表面修飾試驗，掃描電鏡觀

4、察經(jīng)修飾后的支架其內(nèi)部表面有呈膜結構樣PLL層，修飾支架與為修飾支架的細胞體外復合培養(yǎng)試驗結果表明，未修飾支架對細胞粘附率并非隨著ACTM的比例增大而增加，在ACTM含量為10％時，粘附率達到最高值68.06％，而修飾后的支架對細胞的粘附顯著提高到91.33％，但是隨著細胞在支架上的生長和分化，濃度為0.1 mg/mL的PLL修飾后對復合支架上細胞的粘附、生長和分化最佳。
　　本文試驗中，我們成功獲得了乳兔BMSCs并誘導為軟骨細