雙配體與聚乙二醇修飾增強聚合物納米載體腫瘤靶向功效.pdf

1、納米載體腫瘤靶向給藥可提高抗腫瘤藥物療效、降低毒副作用。特異性配體修飾可實現(xiàn)腫瘤細(xì)胞或組織對納米載體的主動識別，增強主動靶向功效。親水性聚合物修飾可延長納米載體的血液循環(huán)時間，增強被動靶向功效。表面修飾可改變納米載體的理化性質(zhì)、蛋白吸附、藥物釋放速率、細(xì)胞攝取和體內(nèi)分布等。本文研究雙配體與聚乙二醇(PEG)修飾對納米載體理化性質(zhì)和體內(nèi)外腫瘤靶向功效的影響。
　　亞油酸聚蘋果酸雙接枝殼聚糖(LMC)水中可自組裝形成納米粒，LMC經(jīng)表

2、面修飾制備主動靶向納米粒，包括:生物素(BT)修飾的LMC納米粒(BT-LMC納米粒)、葉酸(FA)修飾的LMC納米粒(FA-LMC納米粒)、FA和BT雙修飾的LMC納米粒（FA，BT-LMC納米粒）和不同密度PEG修飾的FA-LMC納米粒（低密度:PEG1，F(xiàn)A-LMC納米粒;中密度:PEG2，F(xiàn)A-LMC納米粒;高密度-PEG3，F(xiàn)A-LMC納米粒）。研究單配體、雙配體和不同密度PEG修飾對納米粒理化性質(zhì)和體內(nèi)外腫瘤靶向功效的影響。

3、
　　紅外光譜(FTIR)和核磁共振(1H NMR)研究表明BT、FA和PEG接枝至LMC納米粒;BT在BT-LMC納米粒和FA，BT-LMC納米粒中的取代度(DS)為7.5％，F(xiàn)A在FA-LMC納米粒、FA，BT-LMC納米粒和PEG修飾FA-LMC納米粒中的DS分別為7.5％、4.9％和7.5％，PEG在PEG1，F(xiàn)A-LMC納米粒、PEG2，F(xiàn)A-LMC納米粒和PEG3，F(xiàn)A-LMC納米粒中的DS分別為3.7％、8.9％和1

4、5.1％。BT修飾可增大LMC納米粒的粒徑、減少表面電荷;FA修飾后LMC納米粒的粒徑和表面電荷無顯著變化。FA，BT-LMC納米粒的表面電荷較單配體修飾納米粒少，表明雙配體修飾可減少納米粒的表面電荷。FA-LMC納米粒的粒徑隨PEG修飾密度的升高而增大，表面電荷隨PEG修飾密度的升高而降低。接觸角表征納米粒親水性，BT-LMC納米粒和FA-LMC納米粒的接觸角均顯著小于LMC納米粒(P＜0.01)，F(xiàn)A，BT-LMC納米粒的接觸角顯著

5、小于單配體修飾LMC納米粒(P＜0.05)，F(xiàn)A-LMC納米粒的接觸角隨PEG修飾密度的升高而減小，表明配體和PEG修飾可增強納米粒的親水性。
　　以牛血清白蛋白(BSA)為模型蛋白考察表面修飾對納米粒蛋白吸附的影響，BT-LMC納米粒、FA-LMC納米粒和FA，BT-LMC納米粒的蛋白吸附量分別為LMC納米粒的60.2％、59.1％和85.3％，F(xiàn)A-LMC納米粒的蛋白吸附量隨PEG修飾密度的升高而降低，表明配體和PEG修飾可降

6、低納米粒的蛋白吸附量。以紫杉醇(PTX)為模型藥物考察表面修飾對納米粒釋藥速率的影響，LMC納米粒、BT-LMC納米粒、FA-LMC納米粒和FA，BT-LMC納米粒12 h的累積釋藥百分率分別為79.8％、58.7％、69.7％和40.2％; PEG1，F(xiàn)A-LMC納米粒、PEG2，F(xiàn)A-LMC納米粒和PEG3，F(xiàn)A-LMC納米粒12 h的累計釋藥百分率分別為61.1％、40.4％和22.0％，表明配體和PEG修飾可降低納米粒的釋藥速率

7、。
　　細(xì)胞攝取試驗考察表面修飾對納米粒體外腫瘤靶向功效的影響。制備羅丹明B標(biāo)記的納米粒，考察腫瘤細(xì)胞(SMMC-7721)、正常細(xì)胞(L02)和巨噬細(xì)胞(Raw264.7)對納米粒的攝取。結(jié)果表明SMMC-7721細(xì)胞對BT-LMC納米粒、FA-LMC納米粒和FA，BT-LMC納米粒的攝取分別為LMC納米粒的1.6、2.4和3.0倍;雙配體修飾后L02細(xì)胞對納米粒的攝取減少，表明配體修飾可增強納米粒的體外腫瘤細(xì)胞靶向功效，雙配體

8、修飾納米粒的腫瘤細(xì)胞靶向功效優(yōu)于單配體修飾納米粒。Raw264.7細(xì)胞對納米粒的攝取從高到低依次為:FA，BT-LMC納米粒＞FA-LMC納米粒＞BT-LMC納米粒＞LMC納米粒，表明配體修飾可增加巨噬細(xì)胞對納米粒的攝取。FA-LMC納米粒的細(xì)胞攝取隨PEG修飾密度的升高而降低;PEG3，F(xiàn)A-LMC納米粒在SMMC-7721、L02和Raw264.7細(xì)胞中的攝取分別為FA-LMC納米粒的24.2％、8.9％和27.1％，表明PEG修飾

9、減少細(xì)胞對納米粒的攝取。
　　H22荷瘤小鼠抑瘤率(TIR)和組織分布試驗考察表面修飾對納米粒體內(nèi)腫瘤靶向功效的影響，結(jié)果表明BT-LMC納米粒、FA-LMC納米粒和FA，BT-LMC納米粒的TIR分別為LMC納米粒的1.4、1.3和1.6倍，腫瘤組織PTX相對攝取率（Re）分別為LMC納米粒的1.1、1.2和1.3倍，可見配體修飾可增強納米粒的體內(nèi)腫瘤靶向功效，雙配體修飾納米粒的腫瘤靶向功效優(yōu)于單配體修飾納米粒。PEG修飾FA-