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1、對福州福清、莆田東洋鎮(zhèn)、泉州晉江采集的田間健康及發(fā)生青枯病的茄子植株進行可培養(yǎng)內(nèi)生細菌的分離,從中分離到以Bacillus spp.為主要類群的19類內(nèi)生細菌。 茄子內(nèi)生細菌的種群及數(shù)量隨植株不同部位、不同地區(qū)及不同發(fā)病程度有所變化。采集于福州福清的健康茄子植株根部的內(nèi)生細菌種類多,可達9種,葉部最少,僅有4種;在內(nèi)生細菌數(shù)量方面,莖部最多,可達3.89×105cfu/g,葉部只有4.19×104cfu/g。健康植株的內(nèi)生細菌種
2、類明顯多于發(fā)生青枯病的植株。不同地區(qū)的內(nèi)生細菌種類也明顯不同。 通過因素輪換法和正交試驗設(shè)計,確定內(nèi)生細菌與青枯雷爾氏菌共培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方為:葡萄糖5g,酵母膏5g,蛋白胨10g。將分離到的內(nèi)生優(yōu)勢細菌943、946、964與青枯雷爾氏菌1305進行共培養(yǎng)時,發(fā)現(xiàn)943與1305共培養(yǎng)時,青枯雷爾氏菌1305幾乎不生長,943對1305有一定的拮抗作用;而946、964與1305共培養(yǎng)時,兩者生長菌量均較單獨培養(yǎng)時減少,因此94
3、6、964可以與1305共生,但由于生長條件的限制,表現(xiàn)為競爭關(guān)系。 通過對菌株ITS序列的測定,表明所挑選的菌株均為青枯雷爾氏菌,與青枯雷爾氏菌標準菌株GMl1000的ITS序列的同源性達99%以上。經(jīng)優(yōu)勢內(nèi)生細菌處理后的青枯雷爾氏菌生理及致病性測定后,當λ=0.57時,紫外吸收、當λ=5.6時脂肪酸類型都可分成三大類,當λ=0.98時BOX-PCR多態(tài)性經(jīng)聚類分析菌株可分成四類。但從本質(zhì)上,可以分成兩大類,一類為強致病力菌株
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