二氧化氮(NO2)吸入暴露對(duì)大鼠不同臟器DNA損傷研究.pdf

1、二氧化氮(NO2)是一種常見的大氣污染物，近年來其排放量日益增大。流行病學(xué)研究表明呼吸系統(tǒng)疾病、心血管疾病和局部缺血性心臟病發(fā)病率和死亡率的升高與大氣中NO2水平的升高有關(guān)。毒理學(xué)研究也表明，不同濃度的NO2可以導(dǎo)致動(dòng)物體肺、脾、腎、肝等臟器受損，引起呼吸道疾病、導(dǎo)致血液學(xué)改變和免疫功能的下降等。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)NO2的研究主要集中在對(duì)機(jī)體炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激等損傷效應(yīng)的探討，關(guān)于它對(duì)生物體DNA所造成的損傷作用及分子機(jī)制的研究還鮮見報(bào)道。<

2、br>　　為了探討NO2對(duì)生物體DNA的損傷作用及其分子機(jī)制，為了給人體健康防護(hù)和NO2污染事件發(fā)生時(shí)的臨床治療提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和一定的理論指導(dǎo)作用，本文就NO2對(duì)大鼠肝臟、腎臟、脾臟、心臟細(xì)胞DNA所造成的損傷進(jìn)行了深入的研究。首先采用不同濃度的NO2(0、5、10、20mg/m3)對(duì)Wistar大鼠進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸入暴露染毒，每天染毒6h，持續(xù)7d，然后采用KCl-SDS沉淀法對(duì)大鼠各臟器（肝臟、腎臟、脾臟、心臟）的DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)程度(D

3、PC)進(jìn)行測(cè)定，利用單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)(SCGE)對(duì)各臟器（肝臟、腎臟、脾臟）的DNA斷裂程度進(jìn)行檢測(cè)，以此來判斷NO2吸入暴露對(duì)大鼠不同臟器DNA的損傷程度，并探討其劑量-效應(yīng)關(guān)系。本文實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　1、大鼠經(jīng)過不同濃度NO2吸入暴露后，肝臟、腎臟、脾臟、心臟DPC系數(shù)都受到影響，隨著NO2濃度的增加DPC系數(shù)也隨之增加，二者呈現(xiàn)出正相關(guān)性。肝臟的DPC系數(shù)增長(zhǎng)幅度在NO2濃度為5mg/m3、10mg/m3、20mg/m3

4、時(shí)都是最大。
　　2、用不同濃度NO2對(duì)大鼠進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸入暴露后，肝臟、腎臟、脾臟細(xì)胞中DNA的Olive尾矩、尾矩、尾長(zhǎng)、尾部DNA百分含量、彗星細(xì)胞率都受到一定程度的影響，與對(duì)照組相比，隨著NO2濃度的增加染毒組各指標(biāo)也隨之增加，二者呈現(xiàn)出正相關(guān)性。從分子水平上講，在NO2濃度為20mg/m3時(shí)，脾臟細(xì)胞DNA的五種評(píng)價(jià)指標(biāo)與對(duì)照組相比增長(zhǎng)比例最大，腎臟增長(zhǎng)比例最小;在NO2濃度為10mg/m3時(shí)除了TM外，其余四項(xiàng)指標(biāo)的增長(zhǎng)比

5、例大小順序?yàn)?脾臟＞肝臟＞腎臟;在NO2濃度為5mg/m3時(shí)，TM、TL、彗星細(xì)胞率的增長(zhǎng)比例順序?yàn)?肝臟＞腎臟＞脾臟，OTM和TDNA百分比增長(zhǎng)比例大小順序?yàn)?肝臟＞脾臟＞腎臟。
　　綜上所述，NO2吸入暴露對(duì)大鼠的DNA會(huì)造成一定的損傷。其可能的作用機(jī)制為:NO2進(jìn)入大鼠體內(nèi)后產(chǎn)生大量的自由基(ROS)。隨著ROS的生成，機(jī)體的抗氧化系統(tǒng)被破壞，造成DNA斷裂。DNA發(fā)生斷裂損傷后，與蛋白質(zhì)結(jié)合生成DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)物;另一方