食管鱗癌組織中抑癌基因crnn的表達及其臨床意義.pdf

1、研究背景和目的
　　食管癌是全世界最具有侵襲性的惡性腫瘤之一，據(jù)統(tǒng)計是癌癥所致死亡率的第六位，食管癌的主要病理類型是鱗狀細胞癌，在中國的發(fā)病率比較高，尤其是中國的北部為發(fā)病的高危地區(qū)，平均十萬人中有21人發(fā)病，比其他低發(fā)病率的國家要高20倍之多。河南省林州市及其比鄰的輝縣、安陽等地區(qū)是中國，也是世界上發(fā)病率和死亡率最高的地區(qū)，目前食管癌仍是該地區(qū)居民腫瘤相關(guān)死亡的主要原因，其中男性年發(fā)病率分別高達161/10萬，女性發(fā)病率高達10

2、3/10萬，是影響人民的生活質(zhì)量和健康的非常嚴重的因素。流行病學研究顯示，某些環(huán)境危險因素，包括吸煙和酗酒史、營養(yǎng)缺乏、吃熱食、攝入致癌物都和ESCC有關(guān)。在中國的這些高危區(qū)域內(nèi)，研究顯示有明顯的家族聚集性，說明遺傳易感性和環(huán)境因素可能與該疾病的病因?qū)W有關(guān)。在過去的幾十年里，隨著醫(yī)療水平的不斷進步，食管癌的診療方面都取得了極大的進步，但是患者的預后及生存率仍然很差。迄今為止，食管癌發(fā)生的分子生物學方面的機制仍尚不清楚，所以，為了研究食管

3、癌發(fā)生相關(guān)的基因，提高食管癌的早起診斷率和治療效果，更好地了解腫瘤的發(fā)生機理，尋找腫瘤患者的生物標記，從而做到腫瘤的早期診斷、早期治療及指導用藥等都具有特別重要的意義。
　　為了研究與食管癌的發(fā)生及進展有密切關(guān)系的分子生物學因子，我們在導師的聯(lián)系下，到河南省林州市人民醫(yī)院收集了手術(shù)切除的100例食管癌組織及相應的癌旁正常黏膜組織的石蠟包埋組織樣本，患者的手術(shù)時間為2002年到2005年，所有標本經(jīng)組織病理學檢查證實為原發(fā)性食管鱗狀

4、細胞癌，患者手術(shù)前均未接受任何治療，包括放療和化療。建立了包括臨床病例資料及預后情況的組織芯片。通過免疫組織化學染色發(fā)現(xiàn)，crnn在食管癌組織中的表達明顯低于其對應的癌旁相對正常組織中的表達。
　　研究方法
　　1、臨床標本的收集
　　在河南省林州市人民醫(yī)院收集了100例手術(shù)切除的食管癌組織及其癌旁相對正常的組織，所有的樣本都經(jīng)過常規(guī)的甲醛固定、石蠟包埋、切片和HE染色，病理診斷為食管鱗狀細胞癌，癌旁正常組織中無腫瘤細

5、胞。所有患者術(shù)前均未接受過放療和化療及免疫治療。
　　2、研究方法
　　收集病理切片和HE染色，然后在的病理切片上根據(jù)形態(tài)學特點確定好具有代表性的腫瘤部位，用組織陣列儀支架上的X、Y軸刻度尺定位后，用穿刺取樣針在供體蠟塊相應的位置進行穿刺取樣。預先制備一個45×20mm大小的受體蠟塊，用組織陣列儀（廣州浩翰儀器有限公司生產(chǎn)）穿刺取樣針打出間距為1.8mm，直徑為1mm，深度為3-4mm的孔。然后，將用組織陣列儀穿刺所得的微小

6、圓柱形組織擠壓到接受蠟塊上已制備好的陣列孔中，制作好組織芯片。使用標準的生物素-親和素-過氧化物酶復合物方法進行免疫組化操作，檢測CRNN蛋白在食管癌組織及癌旁正常組織中的表達及是否有差異。
　　研究結(jié)果
　　通過免疫組化所顯示的蛋白的表達情況表明，crnn在在食管癌組織中的表達率相對于癌旁相對正常組織的表達率有所降低，且與相對應的癌旁正常組織相比，食管癌組織存在較高頻率的表達下調(diào)或缺失。通過與患者的臨床病例資料對比，發(fā)現(xiàn)出

7、現(xiàn)crnn表達下調(diào)或缺失與臨床TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。
　　而且通過觀察食管癌患者的五年生存率發(fā)現(xiàn)，crnn基因表達下調(diào)或缺失的食管癌患者的生存率與crnn基因正常表達的食管癌患者相比，生存率有明顯的下降。說明crnn基因的表達與患者的預后相關(guān)。
　　結(jié)論
　　綜上所述，我們認為crnn基因表達的下調(diào)參與了食管鱗狀細胞癌的發(fā)生、發(fā)展及預后，crnn基因表達的下調(diào)可能與食管鱗癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期及生存時間有關(guān)，c