中藥四逆湯化學(xué)物質(zhì)組和代謝組學(xué)研究.pdf

1、四逆湯是《傷寒論》中的經(jīng)典名方，由附子、干姜、甘草組成，具有回陽救逆之功效，現(xiàn)代研究表明四逆湯具有顯著的心血管活性。本論文結(jié)合液質(zhì)聯(lián)用、氣質(zhì)聯(lián)用和核磁共振等多種分析技術(shù)，聯(lián)合化學(xué)物質(zhì)組和代謝組學(xué)的研究模式對四逆湯進(jìn)行了研究，旨在系統(tǒng)的探尋四逆湯的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)理，并為其它中藥復(fù)方研究提供參考。
　　 采用HPLC-DAD-TOFMS技術(shù)對四逆湯中的化學(xué)成分進(jìn)行分離鑒別和結(jié)構(gòu)解析，并對四逆湯給藥后大鼠血漿中的吸收成分和代謝產(chǎn)

2、物進(jìn)行了辨識(shí)。結(jié)合數(shù)據(jù)庫匹配技術(shù)和動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)TOFMS碎片電壓的方法，在四逆湯中共鑒別了53種化學(xué)成分，包括24種生物堿，12種黃酮，13種皂苷和4種姜辣素類化合物，在灌胃給予四逆湯的大鼠血漿中篩選鑒定了33種血清活性成分和5種代謝產(chǎn)物，本研究為四逆湯的代謝和藥效研究奠定了基礎(chǔ)。
　　 發(fā)展了一種結(jié)合UHPLC-DAD、UHPLC-Q-TOFMS和多變量統(tǒng)計(jì)分析技術(shù)的組合分析方法，用于中藥復(fù)方外源性代謝物組的無靶標(biāo)系統(tǒng)篩查和鑒定。

3、采用該方法鑒定了四逆湯給藥后大鼠尿液中102種外源性代謝物，包括53種原型成分和49種代謝產(chǎn)物，推斷四逆湯中烏頭類生物堿在大鼠體內(nèi)的主要代謝途經(jīng)為O-去甲基化和水解，黃酮化合物的主要代謝途經(jīng)為葡萄糖醛酸化、硫酸化、還原、去甲基化、羥化等。該方法可作為中藥復(fù)方代謝物組快速鑒定的重要工具。
　　 采用氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)建立心臟組織提取物的代謝指紋譜，并以阿霉素誘導(dǎo)的小鼠心肌損傷為模型，對四逆湯抗阿霉素心肌病作用進(jìn)行了心臟組織代謝組學(xué)研究，

4、從整體代謝調(diào)控模式證實(shí)了四逆湯抗阿霉素心肌病的作用，發(fā)現(xiàn)了四逆湯通過調(diào)節(jié)糖酵解、三羧酸循環(huán)、脂肪酸氧化和氨基酸代謝而發(fā)揮抗阿霉素心肌病的作用，這為闡釋四逆湯抗阿霉素心肌病的作用機(jī)理提供了新思路。
　　 采用反相色譜和親水作用色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)建立了大鼠全面的血清代謝指紋譜，以冠脈結(jié)扎誘導(dǎo)的大鼠心肌梗死為模型，對四逆湯治療心肌梗死的作用進(jìn)行了血清代謝組學(xué)研究，篩選鑒定了21種心肌梗死潛在的血清生物標(biāo)志物，它們主要涉及鞘脂代謝、磷脂

5、代謝、脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝、色氨酸代謝等代謝途經(jīng)，研究發(fā)現(xiàn)四逆湯通過調(diào)節(jié)這些失衡的代謝途經(jīng)而發(fā)揮治療心肌梗死的作用。
　　 采用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)和核磁共振波譜技術(shù)建立了大鼠尿液代謝指紋譜，以冠脈結(jié)扎誘導(dǎo)的大鼠心肌梗死為模型，對四逆湯治療心肌梗死的作用進(jìn)行了尿液代謝組學(xué)研究，篩選鑒定了19種心肌梗死潛在的尿液生物標(biāo)志物，主要涉及糖酵解、三羧酸循環(huán)、氨基酸代謝、嘌呤代謝和嘧啶代謝等代謝途經(jīng)。進(jìn)一步，我們以改變的代謝通路作為潛在的藥物靶標(biāo)，并