康健關(guān)節(jié)葆對(duì)家兔膝骨性關(guān)節(jié)炎模型關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞中MMP-1、TIMP-1表達(dá)的影響.pdf

1、目的：采用免疫組化法測(cè)定兔KOA關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞中MMP-1、TIMP-1表達(dá)的影響，探討自擬新方康健關(guān)節(jié)葆對(duì)關(guān)節(jié)軟骨修復(fù)和保護(hù)的可能機(jī)制，并闡明該藥在改善關(guān)節(jié)功能和保護(hù)關(guān)節(jié)軟骨等方面的作用，為臨床治療KOA提供實(shí)驗(yàn)及其理論依據(jù)。
　　方法：1.分組、造模：成年健康新西蘭大白兔50只，雌、雄各半，按體重從輕到重進(jìn)行編號(hào)，并隨機(jī)分成5組。A：空白組，B：模型組，C：氨基葡萄糖組（西藥對(duì)照組）， D：壯骨關(guān)節(jié)丸組（中藥對(duì)照組）、 E：康健

2、關(guān)節(jié)葆組（實(shí)驗(yàn)組），每組10只。所有實(shí)驗(yàn)的新西蘭大白兔在同等條件下飼養(yǎng)一周，無其它不適后，進(jìn)行造模，除空白組外，余組用4%木瓜蛋白酶0.1ml右膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射，4周后建立兔右膝骨關(guān)節(jié)炎模型，是目前常用的造模方式。
　　2.給藥方法：在常規(guī)喂養(yǎng)一周后，開始造模、給藥，A組（空白組）：不造模，生理鹽水20ml，二次/日，10ml/次，灌服。B組（模型組）：只造模，生理鹽水20ml，二次/日，10ml/次，灌服。C組（氨基葡萄糖組）：氨

3、基葡萄糖液20ml（0.06g/ml）/日，二次/日，10ml/次，灌服。D組（壯骨關(guān)節(jié)丸組）：壯骨關(guān)節(jié)丸水溶液20ml（0.07g/ml）/日，二次/日，10ml/次，灌服。E組（康健關(guān)節(jié)葆組）：康健關(guān)節(jié)葆水溶液20ml（0.07g/ml）/日，二次/日，10ml/次，灌服。
　　3.取材及檢測(cè)：在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造模4周結(jié)束后，分別取各組兔膝關(guān)節(jié)軟骨，行大體肉眼觀察、HE染色觀察及免疫組化法測(cè)定MMP-1、TIMP－1的含量變化，行統(tǒng)

4、計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果：1.從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的解剖后，肉眼大體觀察顯示，模型組兔膝關(guān)節(jié)軟骨具有明顯的退行性改變，符合造模的要求，康健關(guān)節(jié)葆能很好的緩解關(guān)節(jié)軟骨破壞，且比其它對(duì)照組效果顯著。2.HE染色后光學(xué)顯微鏡觀察及兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞 MMP-1、TIMP-1免疫組化顯示：康健關(guān)節(jié)葆組的 MMP-1表達(dá)較模型組明顯降低，P<0.01有顯著性差異?？到￡P(guān)節(jié)葆組的 TIMP－1表達(dá)較模型組升高，P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。由此可以說明康健關(guān)節(jié)葆能