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1、本文通過(guò)田間觀察和室內(nèi)花粉活力檢測(cè),對(duì)文獻(xiàn)中報(bào)道的可利用的四個(gè)雄性核不育系的育性穩(wěn)定性進(jìn)行了觀察,對(duì)育性穩(wěn)定性表現(xiàn)較好的1355A雄性核不育基因ms2進(jìn)行了分子標(biāo)記定位,以期為棉花雄性核不育系的選擇及利用分子標(biāo)記輔助選擇提高育種效率提供參考。 四個(gè)陸地棉雄性核不育系的育性穩(wěn)定性觀察結(jié)果如下: 1、2005年對(duì)4個(gè)陸地棉GMS(GA<,3>、1355A、中12A和閬A)兩用系進(jìn)行了育性觀察,發(fā)現(xiàn)4個(gè)核不育系群體均存在育性不
2、穩(wěn)定現(xiàn)象。其中1355A的育性穩(wěn)定性相對(duì)最好,不穩(wěn)定株率為14.3%;閬A和中12A的育性穩(wěn)定性最差,不穩(wěn)定株率分別高達(dá)38.9%和36.7%;GA3的居中,不穩(wěn)定株率為19.2%。育性不穩(wěn)定株表現(xiàn)出多種類(lèi)型,各類(lèi)型在4個(gè)雄性核不育系間所占比例不同。 2、2006年對(duì)構(gòu)建的4個(gè)F2育性分離群體進(jìn)行了再次觀察。統(tǒng)計(jì)表明,1355A育性穩(wěn)定性最好,不穩(wěn)定株率11.9%;閬A最差,不穩(wěn)定株率高達(dá)20.3%,結(jié)果顯示與2005相同的趨勢(shì)
3、,說(shuō)明現(xiàn)有棉花核不育的育性不穩(wěn)定現(xiàn)象是客觀存在的。 3、對(duì)4個(gè)GMS兩用系群體不同時(shí)期不育花率的比較顯示:不育花率隨時(shí)間的變化與不穩(wěn)定性有關(guān)。穩(wěn)定性較好的核不育系1355A,不同時(shí)期不育花率變化幅度較小,穩(wěn)定性較差的中12A和閬A變化幅度較大。不育花的不育度檢測(cè)表明,1355A敗育相對(duì)較徹底,中12A、閬A和GA<,3>敗育不徹底。并且,在少數(shù)不育單株花藥未開(kāi)裂的花朵上檢測(cè)到了少量成熟花粉。 4、對(duì)4個(gè)GMS兩用系群體和
4、F2群體的可育單株花粉活性檢測(cè)表明:4個(gè)GMS可育單株花粉都有較好的活力,在室溫下,花粉活力一天內(nèi)變化不明顯。1355A核不育基因mS2定位以陸地棉GMS 1355A為材料,構(gòu)建了包括192個(gè)育性穩(wěn)定單株的F<,2>群體。同質(zhì)完全可育單株和不育單株各10株構(gòu)建了DNA池。對(duì)1545對(duì)SSR、238個(gè)SRAP組合引物進(jìn)行了篩選,獲得40對(duì)(32對(duì)SSR,8個(gè)SRAP組合)多態(tài)性引物,然后再在包括5個(gè)同質(zhì)完全可育單株和7個(gè)不育單株的12個(gè)極
5、性單株上再次篩選,獲得10對(duì)(8對(duì)SSR,2個(gè)SRAP組合)與不育基因有可能共分離的引物,用于1355A的核不育基因定位。 F<,2>群體上獲得10個(gè)(8個(gè)SSR,2個(gè)SRAP組合)多態(tài)性引物,多態(tài)性位點(diǎn)12個(gè)。連鎖分析顯示,3個(gè)SSR標(biāo)記(4個(gè)多態(tài)性位點(diǎn))與雄性不育基因緊密連鎖。標(biāo)記BNL3932<,800>和BNL3932<,870>距ms<,2>僅有1.56cM、2.08cM,位于ms2另一端的BNL236和CIR295遺
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