川芎品質(zhì)評價方法構(gòu)建與規(guī)范化生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程集成.pdf

1、中藥材的品質(zhì)優(yōu)劣會直接影響其產(chǎn)品的臨床療效，如何提高中藥材的品質(zhì)及其穩(wěn)定性，一直受業(yè)內(nèi)人事的高度重視。川芎(Ligusticum chuanx iong Hort.)是傘形科藁本屬多年生的草本植物，以根莖入藥，是治療心腦血管疾病的常用藥材。本文以川芎作為研究對象，首先，構(gòu)建了HPLC指紋圖譜、高壓超聲波優(yōu)化提取新技術(shù)和人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)品質(zhì)定量化評價數(shù)學(xué)模型;其次，通過對氮磷鉀元素配比、配方肥用量、種植密度、播種期和采收期的系統(tǒng)研究，制訂了川

2、芎規(guī)范化生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程。主要研究結(jié)果如下:
　　1.HPLC指紋圖譜構(gòu)建
　　以都江堰、彭州、彭山、什邡等產(chǎn)地的川芎樣品為研究材料，對流動相組成及其配比、流速、柱溫、檢測波長等條件進(jìn)行試驗研究，得出優(yōu)化條件為:流動相0～5 min，乙腈∶甲醇∶1％冰醋酸(20∶40∶40)，5～30 min，乙腈∶甲醇∶1％冰乙酸(60→100∶0∶40→0)，采用等度洗脫和梯度洗脫相結(jié)合的方式進(jìn)行洗脫，流速為0.6 mL·min-1，柱溫為

3、25℃，檢測波長為0～7.3 min，321 nm，7.4～20.8 min，275 nm，20.9～23 min，260 nm，23.1～30 min，275 nm。此HPLC指紋圖譜方法的線性關(guān)系、精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性和加樣回收率均符合色譜指紋圖譜的相關(guān)要求。對色譜圖譜中的共有峰進(jìn)行了鑒定，確認(rèn)出阿魏酸、洋川芎內(nèi)酯I、洋川芎內(nèi)酯H、洋川芎內(nèi)酯A、藁本內(nèi)酯和歐當(dāng)歸內(nèi)酯A6種主要藥效成分。
　　2.高壓超聲波提取新方法構(gòu)建

4、>　　以阿魏酸、洋川芎內(nèi)酯I、洋川芎內(nèi)酯H、洋川芎內(nèi)酯A、藁本內(nèi)酯和歐當(dāng)歸內(nèi)酯A等6種藥效成分為目標(biāo)提取物，對提取溶劑、加壓強度、樣品粉碎度、液料比、提取溫度、超聲功率和提取時間等因素先進(jìn)行了單獨試驗，初步得出其理想條件，然后采用通用旋轉(zhuǎn)組合試驗方法，對交互作用強烈的3個因素（提取溫度、超聲功率和提取時間）進(jìn)行了優(yōu)化試驗，得出同時提取上述6種藥效成分的最佳提取條件是:40％乙醇為提取溶劑、加壓10 MPa、樣品過80目篩、液料比為100

5、∶1、提取溫度為70℃、超聲功率為180W和提取時間為74 min。本研究為首次提出并建立的高壓超聲波提取新技術(shù)，與傳統(tǒng)提取方法相比的優(yōu)點是:降低了提取溫度、縮短了提取時間和增加了藥效成分的提取率，從而降低了提取的成本，提高了工作效率。
　　3.川芎藥材定量化品質(zhì)評價方法構(gòu)建
　　以上述6種藥效成分的含量為川芎藥材品質(zhì)評價指標(biāo)，首次提出用品質(zhì)評價指數(shù)（δ，是用于定量化描述藥材品質(zhì)優(yōu)劣的無量綱參數(shù)）定量化評價中藥材品質(zhì)的概念。

6、以都江堰、彭州、彭山、什邡等地的川芎藥材及市售飲片等為研究材料，用上述已建立的HPLC指紋圖譜方法對樣品進(jìn)行分析，將所得的數(shù)據(jù)通過主成分、層次聚類、相似度和品質(zhì)評價指數(shù)等進(jìn)行分析，并以品質(zhì)評價指數(shù)的目標(biāo)函數(shù)，6種藥效成分的含量為因變量，建立了基于人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)(ANN)的川芎藥材品質(zhì)綜合評價模型:
　　H1=tanh(0.5(10.6066 x1-1.3179 x2+13.4001 x3+1.6723 x4+0.5779 x5-26

7、.2736 x6-5.6332)
　　H2=tanh(0.5(13.2457 x1-9.1249 x2+11.6289 x3-0.1441 x4+0.1966 x5-34.2369 x6-4.8899)
　　H3=tanh(0.5(-2.0291 x1+19.4490 x2-5.0848 x3+0.5648 x4+0.2370 x5+49.9950 x6-4.0533))
　　δ=0.0708 H1+0.2400 H2

8、+0.2322 H+0.9021
　　4.川芎規(guī)范化生產(chǎn)技術(shù)集成
　　研究了播種期、采收期、施肥技術(shù)和種植密度等栽培措施對川芎品質(zhì)和產(chǎn)量的影響，得出優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的施肥技術(shù)為:純氮201～206 kg· hm-2、過磷酸鈣458～522kg· hm-2和硫酸鉀362～388 kg·hm-2，適宜栽種密度為160000～180000株·hm-2，最適播種期為每年的8月1日至8月5日，最佳采收期為5月20日至5月25日。在此基礎(chǔ)上參照