耐鹽堿植物內(nèi)生真菌的分離鑒定及促進(jìn)作物耐鹽菌株的篩選.pdf

1、內(nèi)生真菌普遍存在于各種陸生及水生植物中，在與宿主植物經(jīng)過長(zhǎng)期協(xié)同進(jìn)化的過程中形成了一種互利共生關(guān)系。近些年的研究表明，植物內(nèi)生菌不僅能夠幫助植物抵御病原菌和取食者的傷害，還可以增強(qiáng)宿主植物對(duì)多種逆境如高溫、干旱、鹽害和重金屬等脅迫的抗性，具有重要的研究和開發(fā)價(jià)值。本研究以5種新疆耐鹽堿植物苦豆子、駱駝刺、堿蓬、蘆葦?shù)母拷M織和胡楊的枝條為材料，采用組織塊分離培養(yǎng)方法和形態(tài)學(xué)與分子生物學(xué)相結(jié)合的方法對(duì)5種耐鹽堿植物內(nèi)生真菌進(jìn)行了分離鑒定和

2、多樣性分析，并且對(duì)分離得到的內(nèi)生真菌菌株進(jìn)行了促進(jìn)作物耐鹽菌種的篩選。得到的主要結(jié)果如下:
　　1)由5種植物樣本中分離得到274株內(nèi)生真菌的純培養(yǎng)物。并對(duì)其進(jìn)行了形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定，最終將分離得到的內(nèi)生真菌鑒定為38個(gè)分類單元，分別歸屬于3個(gè)亞門，6個(gè)綱，10個(gè)目，12個(gè)科，19個(gè)屬，其中14個(gè)鑒定到種的水平，其他以rDNA-ITS序列分析為主要依據(jù)，19個(gè)鑒定到屬的水平，5個(gè)鑒定到科的水平。
　　2)四種鹽堿地植物根

3、部和胡楊枝條中內(nèi)生真菌的多樣性水平整體都不高，多樣性指數(shù):駱駝刺(1.76)＞苦豆子(1.49)＞堿蓬(1.48)＞蘆葦(0.41)，胡楊枝條的多樣性指數(shù)是1.40;苦豆子根部?jī)?nèi)生真菌的優(yōu)勢(shì)屬為Fusarium;駱駝刺根部的優(yōu)勢(shì)屬為Alternaria;堿蓬根部的優(yōu)勢(shì)屬是Fusarium和Phoma;胡楊枝條中的優(yōu)勢(shì)屬是Cladosporium;蘆葦根部占據(jù)優(yōu)勢(shì)地位的是Pleosporales類真菌。
　　3)篩選得到了4株在平皿

4、共培養(yǎng)條件下可以穩(wěn)定促進(jìn)植物耐鹽的內(nèi)生真菌菌株，在200mM NaCl鹽脅迫下，接種內(nèi)生真菌KDZ-5、LTC-9、LTC-17、LTC-20的水稻苗在株高上比對(duì)照組平均提高了12.3％、17.8％、21.2％、25.3％;接種KDZ-5和LTC-9的水稻苗在鮮重和干重比對(duì)照分別增加了19.5％、11.1％和78.9％、15.3％。
　　4)水培實(shí)驗(yàn)中，鹽脅迫下，菌株KDZ-5、LTC-9均表現(xiàn)出了對(duì)小麥苗的促生作用:在100mM

5、 NaCl鹽脅迫處理下，接種KDZ-5的小麥苗的鮮重和干重比未接種的處理分別增加了21.6％和13.0％;接種LTC-9的小麥苗的鮮重和干重比未接種的處理分別增加了16.7％和14.6％。
　　5)盆栽實(shí)驗(yàn)中，鹽脅迫下，菌株KDZ-5、LTC-9、LTC-20均表現(xiàn)出了對(duì)小麥苗的促生作用:在200mM NaCl鹽脅迫處理下，接種KDZ-5小麥苗的鮮重和干重比未接種的處理分別增加了10.9％和12.5％;接種LTC-9小麥苗的鮮重和

6、干重比未接種的處理分別增加了3.6％和8.2％。在250mM NaCl鹽脅迫處理下，接種KDZ-5小麥苗的株高、根長(zhǎng)、鮮重上比未接種的小麥苗分別增加了51.4％、10.2％、18.5％;接種LTC-9的小麥苗比未接種的小麥苗分別增加了41.6％、17.9％、10.0％;接種LTC-20的小麥苗比未接種的小麥苗分別增加了54.5％、14.6％、27.2％。
　　6)對(duì)鹽脅迫下小麥葉片中丙二醛(MDA)和脯氨酸的測(cè)定結(jié)果顯示:在鹽脅迫