荷葉內(nèi)生真菌的多樣性分析及可利用菌株的篩選.pdf

1、本研究旨在揭示荷葉內(nèi)生真菌的多樣性及篩選可利用菌株，可豐富內(nèi)生真菌資源，為內(nèi)生真菌與宿主植物、環(huán)境之間的關(guān)系研究奠定基礎(chǔ)，也對(duì)進(jìn)一步研發(fā)荷葉內(nèi)生真菌生產(chǎn)藥物成分和生物酶有重要意義。
　　采用組織分離法進(jìn)行分離、純化，得到323株荷葉內(nèi)生真菌，其中4、5、6、7、8、9、10月份的荷葉內(nèi)生真菌菌株數(shù)分別為9株、51株、55株、63株、43株、45株、57株。通過(guò)菌落形態(tài)特征、顯微觀察和真菌rDNA-ITS序列分析，將所得菌株歸為17

2、個(gè)屬，其中Colletotrichum sp.為優(yōu)勢(shì)屬，相對(duì)頻率為21.05％，Annulohypoxylon nitens sp.和Diaporthales sp.相對(duì)較多，相對(duì)頻率分別為18.58％和8.05％。在4、5、6、7、8、9、10月份中，荷葉內(nèi)生真菌的菌屬數(shù)目分別為2、12、15、15、12、11、12;7月份的分離率最大(35％)，4月份的最小(5％);Shannon-Wiener多樣性指數(shù)呈現(xiàn)出一定的規(guī)律性:4月份(

3、0.53)＜5月份(2.28)＜6月份(2.45)＞7月份(2.42)＞8月份(2.32)＞9月份(2.15)＞10月份(1.81)。
　　通過(guò)篩選分離得到一批有價(jià)值的荷葉內(nèi)生真菌，其中一株能夠產(chǎn)黃酮類(lèi)物質(zhì)的Aspergillus aculeatus HY1，經(jīng)采用硝酸鋁顯色法測(cè)得干菌體總黃酮含量為8.20 mg/g;一株產(chǎn)果膠酶的Colletotrichum sp.HY2，經(jīng)DNS法測(cè)得樣品液中的果膠酶酶活為62.90 U/mL

4、;兩株產(chǎn)纖維素酶的荷葉內(nèi)生真菌，使用DNS法測(cè)定酶活力，Rhodosposporidiobolus sp.HY3的內(nèi)切葡聚糖酶酶活為44.46 U/mL、外切葡聚糖酶酶活為5.80 U/mL、濾紙酶活為為12.04U/mL; Colletotrichum sp.HY4的內(nèi)切葡聚糖酶酶活為28.23 U/mL、外切葡聚糖酶酶活為7.82 U/mL、濾紙酶活為13.52 U/mL。
　　本研究首次分析了荷葉內(nèi)生真菌的多樣性，并篩選得到