平貝母生物堿的提取純化及體外抑菌活性的研究.pdf

1、平貝母是我國(guó)東北地區(qū)常見的一種天然藥用植物資源，為百合科貝母屬植物。平貝母主要功效成分為生物堿，這些生物堿有明顯的鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘等功效，對(duì)呼吸道疾病有較好的治療作用。因此深入研究平貝母的功效成分的提取、純化及其功效評(píng)價(jià)可為醫(yī)藥及保健食品加工提供技術(shù)參考，并對(duì)進(jìn)一步開發(fā)利用這一資源起到較好的促進(jìn)作用。 本課題來(lái)源于黑龍江省科技攻關(guān)項(xiàng)目：《北藥功能成分的提取在保健食品中的應(yīng)用研究》(編號(hào)為GC04C50102)，以黑龍江地產(chǎn)平貝母

2、的干燥鱗莖為研究對(duì)象，對(duì)平貝母中總生物堿的提取、分離純化、體外抑菌活性進(jìn)行了研究，主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下： 1.平貝母中生物堿含量測(cè)定方法的研究用酸性染料比色法對(duì)平貝母樣品中總生物堿的含量進(jìn)行了測(cè)定，測(cè)定結(jié)果：平貝母樣品中總生物堿含量為0.236％。用高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器法(HPLC-ELSD)對(duì)平貝母樣品中主要的生物堿單體含量進(jìn)行了測(cè)定，測(cè)定結(jié)果：平貝母樣品中貝母素甲含量為0.0132％，貝母素乙含量為0.0181％

3、。 2.平貝母中總生物堿提取技術(shù)的研究應(yīng)用溶劑提取法和超臨界二氧化碳萃取法提取平貝總堿，并將這兩種方法進(jìn)行了優(yōu)化。 溶劑提取法先采用單因素試驗(yàn)，分析了乙醇濃度、提取時(shí)間、料液比和浸提時(shí)間對(duì)平貝總堿提取率的影響，然后采用均勻試驗(yàn)設(shè)計(jì)法優(yōu)化了平貝總堿的提取工藝參數(shù)，確定出最佳提取方案為：乙醇濃度95％、提取時(shí)間6h、料液比1：9、浸泡時(shí)間1h，在此條件下平貝總堿提取率為87.12％。 超臨界二氧化碳萃取法先采用單因素

4、試驗(yàn)，確定了萃取壓力、萃取溫度、攜帶劑種類、攜帶劑用量和CO2流量等單項(xiàng)條件對(duì)平貝總堿提取率的影響，然后采用正交試驗(yàn)優(yōu)化了平貝總堿的提取工藝參數(shù)，確定出最佳提取方案為：萃取壓力20MPa，攜帶劑用量300mL，萃取時(shí)間2h，萃取溫度45℃，CO2流量20kg/h，分離壓力8MPa，分離溫度40℃，在此條件下平貝總堿萃取率為92.14％。與溶劑提取法進(jìn)行比較，超臨界二氧化碳萃取平貝總堿的提取率是溶劑提取平貝總堿提取率的1.1倍。

5、3.平貝總堿體外抑菌試驗(yàn)的研究采用紙片擴(kuò)散法考察了平貝總堿對(duì)幾種常見呼吸道致病菌(金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、克雷伯氏肺炎桿菌、銅綠色假單胞桿菌)的體外抑菌作用，用瓊脂平板稀釋法測(cè)定了平貝總堿對(duì)這幾種致病菌的最低抑菌濃度。試驗(yàn)結(jié)果表明：平貝總堿對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、克雷伯氏肺炎桿菌、銅綠色假單胞桿菌均有一定的抑菌作用。對(duì)克雷伯氏肺炎桿菌的最低抑菌濃度為2.5mg/mL；對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠色假單胞桿菌的最低抑菌濃度為5m