原子力顯微鏡在人瘤與非瘤淋巴細(xì)胞鑒別中的應(yīng)用.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文原子力顯微鏡在人瘤與非瘤淋巴細(xì)胞鑒別中的應(yīng)用姓名：張丹丹申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：紀(jì)小龍20080301中文摘要原子力顯微鏡在人體瘤與非瘤淋巴細(xì)胞鑒別中的應(yīng)用摘要目的：研究細(xì)胞印片法是否適用于原子力顯微鏡(AtomicForceMicroscope，AFM)觀察人體瘤與非瘤淋巴細(xì)胞。首次應(yīng)用AFM觀察人體非腫瘤性淋巴結(jié)(正常淋巴結(jié)和反應(yīng)性增生淋巴結(jié))內(nèi)的B淋巴細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞與彌漫性大B

2、細(xì)胞淋巴瘤(DiffuselargeBcelllymphomaDLBCL)內(nèi)的瘤細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞膜表面結(jié)構(gòu)，研究這些細(xì)胞膜表面的結(jié)構(gòu)和膜生物物理特性的變化對其活化及功能活性的調(diào)節(jié)作用，有利于闡明免疫功能改變的機(jī)制。通過比較不同性質(zhì)的淋巴細(xì)胞膜表面結(jié)構(gòu)，及其膜表面特征幾何參數(shù)，為淋巴瘤的快速診斷提供有利證據(jù)，同時拓展單細(xì)胞的研究手段。應(yīng)用AFM及超薄石蠟切片法在亞細(xì)胞水平上觀察彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤，為進(jìn)一步用分子生物學(xué)手段在亞細(xì)胞基因水平

3、研究人淋巴瘤的病理學(xué)奠定了基礎(chǔ)。方法：本實(shí)驗(yàn)通過細(xì)胞印片法將非腫瘤性的淋巴結(jié)及淋巴瘤制成細(xì)胞印片，利用光學(xué)顯微鏡結(jié)合HE染色及免疫組化標(biāo)記對其細(xì)胞組成進(jìn)行計數(shù)分組，計算各細(xì)胞組成所占比例，分析各細(xì)胞在AFM鏡下鑒別的難易程度。利用AFM分別觀察非腫瘤性淋巴結(jié)內(nèi)的B淋巴細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞與DLBCL內(nèi)的瘤細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞膜表面結(jié)構(gòu)，并利用AFM附帶軟件的線分析及面分析功能，得到其細(xì)胞膜表面結(jié)構(gòu)的高低差Rpv、均方根粗糙度Rrms、平均粗糙度