不同劑量硝酸銀和滑石粉對胸膜粘連效果以及肺損傷的實驗研究.pdf

1、目的:通過比較不同濃度硝酸銀和滑石粉漿在大鼠氣胸模型中產(chǎn)生胸膜粘連的效果、對肺組織的損傷以及轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)在胸膜固定中所起的作用,探討硝酸銀和滑石粉產(chǎn)生胸膜粘連的機(jī)制,并且為選擇一種適合于臨床應(yīng)用的胸膜硬化劑提供理論依據(jù)。
　　 方法:健康成年雄性SD大鼠150只,隨機(jī)分為對照組(N組,6只)?；劢M(T組,72只)和硝酸銀組(A組,72只)。建立大鼠氣胸模型:(1)對照組胸腔內(nèi)注入0.9％生理鹽水1ml;(

2、2)A組平均分為A1、A2、A3三個小組,每組24只,A1組注入0.05％硝酸銀1ml,A2組注入0.1％硝酸銀1 ml,A3組注入0.5％硝酸銀1ml;(3)T組平均分為T1、T2、T3三個小組,每組24只,T1組注入500mg/kg滑石粉+0.9％生理鹽水1ml,T2組注入100mg/kg滑石粉+0.9％生理鹽水1ml,T3組注入50mg/kg滑石粉+0.9％生理鹽水1ml。A組和T組分別在第1d、1w、2w、4w(對照組在第1d)

3、時,進(jìn)行剖胸探查并收集標(biāo)本,化驗血常規(guī),對大鼠進(jìn)行胸膜粘連積分、胸膜炎性積分、胸膜纖維化積分及TGF-β1表達(dá)的積分光密度值測定。
　　 結(jié)果:
　　 1滑石粉組
　　 1.1胸膜粘連積分:三組大鼠胸膜粘連積分均隨注入硬化劑的時間延長而增高。在第四周時各組胸膜粘連積分均達(dá)到最大,500mg/kg滑石粉組2.33±0.77,100mg/kg滑石粉組1.83±0.75,50mg/kg滑石粉組1.33±0.52,其中5

4、00mg/kg滑石粉組顯著高于50mg/kg滑石粉組(P＜0.05)。
　　 1.2鏡下炎性積分:三組大鼠炎性反應(yīng)積分第一周時達(dá)到高峰,之后逐漸下降,到第四周胸膜炎性積分與第一天相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05),在第一周時炎性積分分別為:500mg/kg滑石粉組2.83±1.17,100mg/kg滑石粉組2.50±1.05,50mg/kg滑石粉組2.00±1.10,各組間在各觀察點均為無顯著差異(P＞0.05)。
　　

5、1.3三組大鼠胸膜纖維化積分:三組不同濃度滑石粉組大鼠胸膜纖維化積分到第二周時達(dá)到高峰值,500mg/kg滑石粉組2.67±0.82,100mg/kg滑石粉組2.00±0.89,50mg/kg滑石粉組1.33±1.07,500mg/kg滑石粉組顯著高于50mg/kg滑石粉組(P＜0.05)。
　　 1.4血中白細(xì)胞計數(shù):三種濃度滑石粉組術(shù)后第一天白細(xì)胞計數(shù)均顯著高于對照組(P＜0.05),500mg/kg滑石粉組顯著高于100m

6、g/kg和50mg/kg滑石粉組;術(shù)后第一周各組白細(xì)胞計數(shù)均增高,500mg/kg滑石粉組顯著高于50mg/kg滑石粉組(P＜0.05)。
　　 1.524小時胸腔積液量:500mg/kg滑石粉組1.88±0.78顯著高于100mg/kg滑石粉組1.03±0.59和50mg/kg滑石粉組0.60±0.32(P＜0.05)。
　　 1.6肺組織TGF-β1活性表達(dá)積分:三種濃度滑石粉組術(shù)后第一天與對照組比較無明顯統(tǒng)計學(xué)差異

7、(P＞0.05),各組TGF-β1活性表達(dá)積分在第二周時達(dá)到高峰值,均顯著高于第一天和第四周時的表達(dá)積分,第二周時500mg/kg滑石粉組6.17±1.60,100mg/kg滑石粉組4.00±1.26,50mg/kg滑石粉組3.33±1.63,500mg/kg滑石粉組顯著高于50mg/kg滑石粉組(P＜0.05)。
　　 2硝酸銀組
　　 2.1三組大鼠胸膜粘連積分:三組大鼠胸膜粘連積分均隨注入硬化劑的時間延長而增高。在

8、第四周時各組胸膜粘連積分均達(dá)到最大,0.5％硝酸銀組3.50±0.55,0.1％硝酸銀組3.17±0.75,0.05％硝酸銀組1.67±0.52,其中0.5％和0.1％硝酸銀組顯著高于0.05％硝酸銀組(P＜0.05)。
　　 2.2三組大鼠鏡下胸膜炎性積分:三組大鼠炎性反應(yīng)積分第一周時達(dá)到高峰,之后逐漸下降,到第四周時胸膜炎性積分與第一天相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05),在第一周時炎性積分分別為:0.5％硝酸銀組3.67±0.

9、52,0.1％硝酸銀組3.33±0.82,0.05％硝酸銀組2.33±1.03。在第一周、第二周和第四周時0.5％硝酸銀組顯著高于0.05％硝酸銀組(P＜0.05)。
　　 2.3三組大鼠胸膜纖維化積分:三組不同濃度硝酸銀組術(shù)后胸膜纖維化積分均為第一天顯著低于第一周、第二周和第四周三個觀測點,在第四周時胸膜纖維化積分最高,第一天三組纖維化積分比較無明顯差異,第一周0.5％硝酸銀組纖維化積分3.00±0.89,0.1％硝酸銀組2.

10、67±0.81,0.05％硝酸銀組1.17±0.85,0.5％硝酸銀組和0.1％硝酸銀組間比較無顯著差異(P＞0.05),但二者均顯著高于0.05％硝酸銀組(P＜0.05);在第二周時0.5％硝酸銀組顯著高于0.05％硝酸銀組(P＜0.05),0.5％硝酸銀組為3.50±0.84,0.05％硝酸銀組1.83±0.75;第四周時0.5％硝酸銀組3.67±0.52,0.1％硝酸銀組3.33±0.52,0.05％硝酸銀組2.17±1.17,0

11、.5％和0.1％硝酸銀組顯著高于0.05％硝酸銀組(P＜0.05)。
　　 2.4血中白細(xì)胞計數(shù):三組不同濃度硝酸銀組大鼠術(shù)后第一天白細(xì)胞計數(shù)顯著高于對照組(P＜0.05),0.5％和0.1％硝酸銀組顯著高于0.05％硝酸銀組(P＜0.05)。在一周時各硝酸銀組白細(xì)胞計數(shù)增高,0.5％硝酸銀組顯著高于0.05％硝酸銀組。0.5％硝酸銀組和0.1％硝酸銀組在各觀測點均無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 2.524小時胸腔

12、積液量:0.5％硝酸銀組4.37±1.00顯著高于0.1％硝酸銀組2.20±0.65和0.05％硝酸銀組0.77±0.20,0.1％硝酸銀組顯著高于0.05％硝酸銀組(P＜0.05)。
　　 2.6肺組織TGF-β1活性表達(dá)積分:術(shù)第一天0.5％硝酸銀組顯著高于對照組(P＜0.05),各組均隨時間延長,TGF-β1活性表達(dá)亦增強(qiáng)。在第一周和第二周時0.5％和0.1％硝酸銀TGF-β1活性表達(dá)積分顯著高于第一天和第四周水平(P＜0

13、.05),第一周時0.5％硝酸銀顯著高于0.05％硝酸銀組,第二周時0.5％和0.1％硝酸銀組顯著高于0.05％硝酸銀組(P＜0.05)。0.5％硝酸銀組和0.1％硝酸銀組在各觀測點均無顯著差異。
　　 2.7術(shù)后各組大鼠一般情況:0.05％硝酸銀組大鼠術(shù)后第一天精神稍差、可進(jìn)食少量,術(shù)后第二天精神、飲食均基本恢復(fù);0.1％硝酸銀組術(shù)后第一天精神差,飲食量少,術(shù)后第二天稍有恢復(fù),術(shù)后第三天與0.05％硝酸銀組大鼠基本無異;而0.

14、5％硝酸銀組術(shù)后第一內(nèi)死亡4只,其余大鼠精神差,口鼻有出血,不進(jìn)食,術(shù)后第二天死亡2只,其余大鼠精神仍較差,口鼻出血無增加,可進(jìn)少量水,術(shù)后第三天大鼠精神稍有恢復(fù),進(jìn)食少量。之后大鼠逐漸恢復(fù),第五天時與其余各組基本無異。
　　 3硝酸銀和滑石粉組比較:
　　 3.1胸膜粘連積分比較:在第二周時0.5％硝酸銀組胸膜粘連積分顯著高于各濃度滑石粉組;第四周時0.5％和0.1％硝酸銀組胸膜粘連積分顯著高于各濃度滑石粉組(P＜0.

15、05)。
　　 3.2胸膜炎性積分:0.5％硝酸銀組和0.1％硝酸銀組和500mg/kg滑石粉組在各觀測點均無顯著差異(P＞0.05),在第一周、第二周和第四周時0.5％硝酸銀組顯著高于100mg/kg滑石粉組和50mg/kg滑石粉組(P＜0.05),0.1％硝酸銀組在第一周和第二周時顯著高于50mg/kg滑石粉組(P＜0.05)。
　　 3.3胸膜纖維化積分:第一天時硝酸銀和滑石粉間比較無顯著差異,第一周和第二周時0.

16、5％硝酸銀組、0.1％硝酸銀組和500mg/kg滑石粉組間無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05),0.5％硝酸銀組顯著高于100mg/kg滑石粉組和50mg/kg滑石粉組;第四周時0.5％和0.1％硝酸銀組顯著高于三種不同濃度滑石粉組(P＜0.05)。
　　 3.4血中白細(xì)胞計數(shù):術(shù)后第一天和第一周0.5％、0.1％硝酸銀組和500mg/kg滑石粉組均無顯著差異(P＞0.05)。
　　 3.524小時胸腔積液量:0.5％硝酸銀組顯

17、著高于各濃度滑石粉組(P＜0.05),0.1％硝酸銀組和500mg/kg滑石粉組比較無顯著差異(P＞0.05)。
　　 3.6肺組織TGF-β1活性表達(dá)積分:0.5％硝酸銀組、0.1％硝酸銀組和500mg/kg滑石粉組在各觀測點均無顯著差異,第一周和第二周時0.5％硝酸銀組顯著高于100mg/kg和50mg/kg滑石粉組(P＜0.05)。
　　 3.7術(shù)后各組大鼠一般情況:0.5％硝酸銀組術(shù)后死亡率達(dá)25％,且術(shù)后恢復(fù)時

18、間較長(達(dá)5天左右),0.1％硝酸銀組和500mg/kg滑石粉組術(shù)后均未出現(xiàn)死亡,術(shù)后3天基本恢復(fù)。
　　 結(jié)論:硝酸銀和滑石粉產(chǎn)生胸膜固定術(shù)的效果與所用硬化劑的濃度、劑量有一定關(guān)系,所用硬化劑濃度高的大鼠組肺損傷程度較大,產(chǎn)生胸膜粘連效果較好。胸膜固定術(shù)的主要機(jī)制是無菌性炎癥反應(yīng)以及炎性細(xì)胞的黏附過程。而TGF-β1在胸膜粘連過程中起著纖維化形成與發(fā)展的樞紐作用,是滑石粉漿和硝酸銀所致胸膜粘連的關(guān)鍵。兩種硬化劑進(jìn)行比較,0.5