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1、目的:建立快速、靈敏的血清銅、鋅、鐵勻相自動(dòng)化檢測(cè)法。 方法:在表面活性劑存在下,分別用2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-二乙氨基酚(5-Br-PADAP)、2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-[(N,N-二羧基甲基)氨基]苯酚(5-Br-PADCAP)、2-(5-硝基-2-吡比啶偶氮)-5-[N-正丙基N-(3-磺酸丙基)氨基]苯酚(5-Nitro-PAPS)作顯色劑勻相自動(dòng)化法測(cè)定血清銅、鋅、鐵。通過(guò)對(duì)這些測(cè)定體系的水溶性、靈
2、敏度、試劑成本等因素的考察,從中篩選出水溶性好、靈敏度高、試劑成本低、適合臨床推廣應(yīng)用的勻相自動(dòng)化分析法。 結(jié)果:以5-Br-PADAP勻相自動(dòng)化分析法測(cè)定血清銅、鋅、鐵,線性范圍分別為0-80μmol/L、0~80μmol/L、0~85μmol/L,平均回收率分別為100.7%、100.9%、99.7%,批內(nèi)變異系數(shù)(CV)和批間變異系數(shù)分別為0.015~0.020、0.019~0.023、0.014~0.016和0.023~
3、0.030、0.025~0.030、0.016~0.025,與原子吸收分光光度法的線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)分別為Y=0.9987X-0.090(r=0.9803)、Y=1.001X-0.093(r=0.9948)、Y=0.9939X+0.117(r=0.9889),健康人群的銅、鋅、鐵含量分別為11.44~21.92μmol/L、7.76~22.20μmol/L、9.22~29.62μmol/L。 以5-Br-PADCAP勻相自動(dòng)
4、化分析法測(cè)定血清銅、鋅、鐵,線性范圍分別為0~65μmol/L、0~80μmol/L、0~140μmol/L,平均回收率分別為100.7%、100.3%、100.2%,批內(nèi)變異系數(shù)(CV)和批間變異系數(shù)分別為0.021~0.025、0.011~0.029、0.010~0.014和0.025~0.041、0.021~0.034、0.015~0.021,與原子吸收分光光度法的線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)分別為Y=1.0170X-0.367(r=0
5、.9908)、Y=0.9917X-0.175(r=0.9968)、Y=0.9933X+0.256(r=0.9819),健康人群的銅、鋅、鐵含量分別為11.03~21.57μmol/L、8.49~22.14μmol/L、9.42~29.86μmol/L。 以5-Nitro-PAPS勻相自動(dòng)化分析法測(cè)定血清銅、鋅、鐵,線性范圍分別為0~63μmol/L、0~71μmol/L、0~140μmol/L,平均回收率分別為100.7%、10
6、0.2%、99.2%,批內(nèi)變異系數(shù)(CV)和批間變異系數(shù)分別為0.021~0.033、0.019~0.024、0.024~0.035和0.027~0.038、0.031~0.035、0.029~0.037,與原子吸收分光光度法的線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)分別為Y=1.0100X-0.270(r=0.9982)、Y=0.9970X+0.170(r=0.9913)、Y=0.9920X+0.120,(r=0.9883),健康人群的銅、鋅、鐵含量分
7、別為9.70~24.10μmol/L、9.20~23.83μmol/L、11.20~28.40μmol/L。 結(jié)論:三種方法學(xué)的共同點(diǎn):本研究所建立的血清銅、鋅、鐵5-Br-PADAP、5-Br-PADCAP、5-Nirto-PAPS勻相自動(dòng)化分析法,均具有快速、簡(jiǎn)便、靈敏度高、選擇性好等特點(diǎn)。 三種方法學(xué)的差異:5-Br-PADAP勻相自動(dòng)分析法試劑來(lái)源方便,但其測(cè)定試劑水溶較差,對(duì)全自動(dòng)生化分析儀的管道存在一定污染。
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