基質(zhì)金屬蛋白酶16在食管鱗癌中的表達(dá)及其生物學(xué)功能.pdf

1、廈門大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立完成的研究成果。本人在論文寫作中參考其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表的研究成果，均在文中以適當(dāng)方式明確標(biāo)明，并符合法律規(guī)范和《廈門大學(xué)研究生學(xué)術(shù)活動(dòng)規(guī)范(試行)》。另外，該學(xué)位論文為()課題(組)的研究成果，獲得()課題(組)經(jīng)費(fèi)或?qū)嶒?yàn)室的資助，在()實(shí)驗(yàn)室完成。(請?jiān)谝陨侠ㄌ杻?nèi)填寫課題或課題組負(fù)責(zé)人或?qū)嶒?yàn)室名稱，未有此項(xiàng)聲明內(nèi)容的，可以不作特別聲明。)聲明人(簽名)：取萬qpJ

2、弓年‘月q日摘要背景及目的食管癌是世界第六大癌癥死因，臨床上多數(shù)患者就診時(shí)已經(jīng)進(jìn)入中晚期，手術(shù)效果差，五年生存率僅徘徊在10％20％。其治療效果不佳的主要原因是腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移?；|(zhì)金屬蛋白酶是腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移過程中周圍基質(zhì)降解和重塑得重要酶，但MMP抑制劑在多種癌癥患者身上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，這種藥物無法減緩腫瘤生長，有時(shí)甚至加快腫瘤生長，這提示并非所有MMP均為原癌基因。基質(zhì)金屬蛋白酶16在多種腫瘤組織中有較高的表達(dá)，但在食管癌中的表達(dá)及與食

3、管癌侵襲和轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究目前尚未有報(bào)道。我們檢測食管癌組織標(biāo)本MMP16的表達(dá)水平與臨床病理資料的相關(guān)性，并采取RNA干擾的方法，建立了有效的MMP16基因沉默的Ecal09細(xì)胞株，觀察食管鱗癌細(xì)胞在遷移和侵襲方面的改變，研究食管鱗癌治療的策略以及探討食管癌的治療的基因靶點(diǎn)。方法1應(yīng)用免疫組化、Westernblot及RealTimePCR檢測食管癌及配對遠(yuǎn)癌組織的MMP16蛋白及MMP16mRNA表達(dá)情況及I臨床意義。2對食管鱗癌高分

4、化細(xì)胞系Ec9706、Ecl09、TEl進(jìn)行常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)，我們從mRNA和蛋白水平方面，采取RealTimePCR和Westernblot檢測這3種細(xì)胞系中MMP一16的表達(dá)，并篩出相對高表達(dá)MMP16的細(xì)胞系。3設(shè)計(jì)合成4對MMP16基因的shRNA(shRNA1，2，3，4)，采用陽離子聚合物試劑穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Ecl09，利用RealTimePCR和Westernblot檢測穩(wěn)轉(zhuǎn)shRNA后MMP16mRNA及蛋白的沉默效果，并篩選出合適