幾種模擬環(huán)境污染因素對IBV M41的影響.pdf

1、禽傳染性支氣管炎病毒屬于冠狀病毒，引起雞高度傳染性的呼吸系統(tǒng)疾病。近幾十年，人們發(fā)現(xiàn)IBV血清型復(fù)雜，易變異，毒株種類越來越多，傳播的范圍不斷擴(kuò)大，這些變化與環(huán)境污染漸趨嚴(yán)重是分不開的。原有的生態(tài)平衡遭到破壞，導(dǎo)致新的傳染病頻頻發(fā)生，這一點(diǎn)已成共識(shí)。本實(shí)驗(yàn)將四種化學(xué)物質(zhì)(洛克沙砷、亞硝酸鈉、硝基苯和慶大霉素)及其混合物添加到IBV M41株在雞胚腎細(xì)胞(CEK)上傳代的培養(yǎng)液中，觀察上述四種化學(xué)物質(zhì)對IBV增殖的影響，并對IBV S1基

2、因進(jìn)行序列分析。實(shí)驗(yàn)旨在研究部分模擬環(huán)境污染因素體外直接或間接作用，對IBV有關(guān)特性的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 1．用MTT法檢測四種化學(xué)試劑的細(xì)胞活性作用。首先測定了四種化學(xué)物質(zhì)及其混合物對雞胚腎細(xì)胞(CEK)的適宜可用濃度，將單獨(dú)四種物質(zhì)及四種物質(zhì)的混合物分別加入培養(yǎng)36h，80％形成單層后的CEK中，觀察CEK增殖與存活時(shí)間。結(jié)果表明，高濃度添加對CEK有一定影響，中濃度的洛克沙砷、亞硝酸鈉和硝基苯縮短CEK生存時(shí)間，而幾種污

3、染物低濃度時(shí)對細(xì)胞活性均無顯著影響。 2．TCID50實(shí)驗(yàn)檢測，觀察對IBV增殖的影響。將不同濃度的洛克沙砷、亞硝酸鈉和硝基苯、慶大霉素及幾種化學(xué)物質(zhì)的混合物和IBV分別以如下方式加入CEK單層：①先加化學(xué)物質(zhì)，作用1h后加病毒；②先加病毒、作用1h后加化學(xué)物質(zhì)；③病毒和幾種化學(xué)物質(zhì)體外感作1h后加入細(xì)胞。在硝基苯及洛克沙砷與IBV作用的高劑量組，病毒增殖受到明顯影響。上述三種加藥方式中，四種化學(xué)物質(zhì)低劑量添加對IBV增殖均未表

4、現(xiàn)出抑制作用。 3．經(jīng)藥物作用后的IBV S1基因經(jīng)序列測定，測序結(jié)果用DNAMAN分析軟件分析，結(jié)果表明：實(shí)驗(yàn)中單一種類化學(xué)物伴隨添加并傳15代的IBV核苷酸序列和陽性對照組病毒與未傳代病毒之間同源性從99.1％～99.7％不等，所推導(dǎo)的氨基酸序列同源性從98.6％～99.6％；混合物伴隨傳15代的病毒核苷酸核苷酸序列和陽性對照組病毒與未傳代病毒之間同源性從98.3％～99.4％，所推導(dǎo)的氨基酸序列同源性從97.4％～99.1